Zavedenie metódy pre izoláciu exozómov z ľudskej krvi

Gállová, Michaela

Publikace:
Zavedenie metódy pre izoláciu exozómov z ľudskej krvi

Diplomová práceopen access

dc.contributor.advisor	Bílková, Zuzana
dc.contributor.author	Gállová, Michaela
dc.date.accepted	2020-09-08
dc.date.accessioned	2020-09-16T14:33:09Z
dc.date.available	2020-09-16T14:33:09Z
dc.date.issued	2020
dc.date.submitted	2020-07-01
dc.description.abstract	Táto diplomová práca je zameraná na zavedenie systému izolácie exozómov, pomocou ktorej by bolo možné detegovať tieto EVs z ľudskej krvi. Tento Systém je založený na kombinácii imunoanalýzy magnetickej separácie na báze imunoprecipitácie a imunochemickej detekcie vyizolovaných exozómov komerčným izolačným kitom. Princíp separácie spočíva v reakcii antigénu v podobe povrchových proteínov na exozómoch so špecifickými monoklonálnými a polyklonálnymi protilátkami imobilizovanými na komerčných magnetických časticiach namierených proti týmto exozomálnym proteínom. Prítomnosť exozómov vo vzorkách séra je detegovaná metódou Semi-Dry Western blot pomocou sekundárnych protilátok značených chrenovou peroxidázou (HRP) pre chemiluminiscenčnú detekciu po predchádzajúcom rozdelení proteínov SDS-PAGE analýzou. Konečným overením prítomnosti exozómov vo vyizolovanej frakcii je hmotnostná analýza po proteolytickom naštepení proteínov z gélu modifikovaným trypsínom.	slo
dc.description.abstract-translated	This diploma thesis is focused on the introduction of a system of isolation of exosomes, which could be used to detect these EVs from human blood. This system is based on a combination of magnetic separation immunoassay based on immunoprecipitation and immunochemical detection of isolated exosomes with a commercial isolation kit. The principle of separation is the reaction of antigen in the form of surface proteins on exosomes with specific monoclonal and polyclonal antibodies immobilized on commercial magnetic particles directed against these exosomal proteins. The presence of exosomes in serum samples is detected by Semi-Dry Western blot using horseradish peroxidase (HRP) labeled secondary antibodies for chemiluminescent detection after pre-separation of the proteins by SDS-PAGE analysis. The final verification of the presence of exosomes in the isolated fraction is the mass analysis after proteolytic digestion of the proteins from the gel with modified trypsin.	eng
dc.description.defence	1. Prezentace výsledků diplomové práce. 2. Diskuze k posudkům vedoucího a oponenta diplomové práce. 3. Studentka zodpověděla všechny dotazy a připomínky k diplomové práci.	cze
dc.description.department	Fakulta chemicko-technologická	cze
dc.description.grade	Dokončená práce s úspěšnou obhajobou	cze
dc.format	120 s.
dc.identifier.stag	39785
dc.identifier.uri	https://hdl.handle.net/10195/76614
dc.language.iso	slo
dc.publisher	Univerzita Pardubice	cze
dc.rights	Bez omezení
dc.subject	exozómy	slo
dc.subject	extracelulárne vezikuly	slo
dc.subject	imunoprecipitácia	slo
dc.subject	magnetické častice	slo
dc.subject	polyklonálne a monoklonálne protilátky	slo
dc.subject	SDS-PAGE	slo
dc.subject	Semi-Dry Western blot analýza	slo
dc.subject	ľudské sérum	slo
dc.subject	exosome	eng
dc.subject	extracellular vesicles	eng
dc.subject	imunoprecipitation	eng
dc.subject	magnetic beads	eng
dc.subject	polyclonal and monoclonal antibody	eng
dc.subject	SDS-PAGE	eng
dc.subject	Semi-Dry Western blot analysis	eng
dc.subject	human serum	eng
dc.thesis.degree-discipline	Bioanalytik	cze
dc.thesis.degree-grantor	Univerzita Pardubice. Fakulta chemicko-technologická	cze
dc.thesis.degree-name	Mgr.
dc.thesis.degree-program	Speciální chemicko-biologické obory	cze
dc.title	Zavedenie metódy pre izoláciu exozómov z ľudskej krvi	cze
dc.title.alternative	Development of method for exosomes isolation from human blood	eng
dc.type	diplomová práce	cze
dspace.entity.type	Publication