Diplomová práce je věnována výzkumu a optimalizaci podmínek ternárních (třísložkových) mobilních fází a gradientů v HILIC chromatografii (Hydrophilic Interaction Liquid Chromatography). Cílem bylo posoudit potenciální dopad kombinace methanolu s mobilními fázemi acetonitrilu a vodného pufru. Z recentní literatury vyplývá, že kombinace acetonitrilu a methanolu v mobilní fázi může ovlivňovat charakter difuzní vodné vrstvy na povrchu HILIC stacionární fáze a mít vliv na selektivitu separace. Jako modelové analyty byly zvoleny nukleové báze, nukleosidy, barbituráty a sulfonamidy, které patří do kategorie polárních látek vhodných pro separaci. Bylo proměřeno retenční chování v gradientech s acetonitrilem a methanolem a byly určeny parametry retenčního modelu z gradientových dat. Na základě parametrů predikovaných retenčních časů jsou diskutovány vlivy uvedených organických rozpouštědel.
