Tato diplomová práce se zabývá separací paracetamolu a jeho metabolitů pomocí chromatografie hydrofilních interakcí. Teoretická část je zaměřena na paracetamol z hlediska jeho mechanismu účinku, metabolismu a toxicity v těle. Dále pak pojednává o kapalinové chromatografii a detailně o chromatografii hydrofilních interakcí, jejím mechanismu separace, využívaných mobilních a stacionárních fází a jeho použití v praxi. V závěru této části je zpracována rešerše prací, zabývajících se analýzou paracetamolu a jeho metabolitů v kapalinové chromatografii. V experimentální části práce jsou popsány měření vedoucí k výběru nejvhodnějších mobilní a stacionární fázi pro separaci paracetamolu a jeho metabolitů za podmínek pro chromatografii hydrofilních interakcí.