Tato diplomová práce se zabývá izolací, purifikací a frakcionací fosfopeptidů mikrogradientovou chromatografií na kolonách se stacionární fází s oxidem titaničitým a následnou analýzou frakcí pomocí hmotnostní spektrometrie. K optimalizaci mikrogradientové separace a frakcionace fosfopeptidů na TiO2 mikrokuličkách byly použity jednoduché směsi peptidů trypticky naštěpených standardních proteinů -kaseinu, hovězího sérového albuminu a fosvitinu. Následně byla optimalizovaná separace vyzkoušena a ověřena pomocí celobuněčného lyzátu Jurkat buněk (T-buněčného lymfomu) naštěpeného trypsinem.