Biosenzory a analyzátory s kotvenou acetylcholinesterasou pro stanovení kofeinu

Abstract

V úvodní teoretické části jsou popsány význam a mechanismy účinku acetylcholinu a acetylcholinesterasy v organismu, dále základní vlastnosti, metabolismus a interakce kofeinu s receptory. V experimentální části se práce zabývá možnostmi konstrukce biosenzoru pro stanovení inhibice acetylcholinesterasy kofeinem. Aktivita enzymu a stanovení kinetických parametrů Km, Vmax, Ki nebo IC50 byla zkoumána spektrofotometrickou Ellmanovou metodou a elektrochemickými metodami. Z těchto byly použity square-wave voltametrie a potenciometrická titrace v pH-statu. Byly zkoumány způsoby imobilizace acetylcholinesterasy pomocí prosté sorpce, různých koncentrací želatiny, sol-gelu, celulózových a magnetických částic.