Stanovení vybraných vitamínů rozpustných v tucích pomocí HPLC

Abstract

Stanovili jsme hladiny vybraných vitaminů rozpustných v tucích v plazmě pacientů s kardiovaskulárním onemocněním a u dárců krve (n = 129) pomocí HPLC na obrácených fázích s UV/VIS detekcí. Retinol, ?-tokoferol, ?-karoten a lykopen byly separovány na koloně Discovery HS C18 (15 cm x 4 mm, 5 ?m) užitím isokratické eluce. Použitá mobilní fáze byla směsí methanolu a ethanolu (75:25, v/v) a průtok dosahoval 0,8 ml.min-1. Vitaminy byly stanoveny současně s použitím dvou vnitřních standardů, retinyl acetátu pro retinol a karotenoidy a tokoferol acetátu pro ?-tokoferol. Přesnost v sérii, vyjádřená variačním koeficientem byla 4,9% pro retinol, 2,6% pro ?-tokoferol, 4,7% pro ?-karoten a 21,6% pro lykopen. Správnost metody vyjádřená výtěžností metody pro retinol, ?-tokoferol, ?-karoten a lykopen byla následující: 95,5% (CV 6,2%), 91,5% (CV 4,5%), 90,4% (CV 3,2%) a < 50%.