Vliv růstových faktorů na expresi genů v jaterních myofibroblastech potkanů

Peterová, Eva

Publikace:
Vliv růstových faktorů na expresi genů v jaterních myofibroblastech potkanů

Diplomová práceOmezený přístup

dc.contributor.advisor	Bílková, Zuzana	cze
dc.contributor.author	Peterová, Eva
dc.contributor.referee	Köhlerová, Renata	cze
dc.date.accepted	2011	cze
dc.date.accessioned	2011-07-11T16:52:02Z
dc.date.available	2011-07-11T16:52:02Z
dc.date.issued	2011
dc.description.abstract	Jaterní tkáň je tvořena několika typy buněk. Při poranění jater dochází k fibrotizaci nekrotické tkáně, pomocí aktivovaných jaterních hvězdicovitých buněk (HSC) a portálních myofibroblastů. V této práci jsme sledovaly vliv kultivačního prostředí v kombinaci s růstovým faktorem FGF-1 na expresi určitých genů v jaterních myofibroblastech. V první fázi experimentu jsme se zaměřily na srovnání exprese genů v buňkách kultivovaných v dvojrozměrném (2D) prostředí na polystyrenových Petriho miskách s kultivací v trojrozměrném (3D) kolagenním gelu. V obou případech po dvanácti hodinové expozici růstovým faktorem FGF-1. V druhé fázi pokusu jsme se zaměřili na interakci FGF-1 s heparinem. Buňky jsme získali z frakce neparenchymových jaterních buněk potkanů pomocí opakovaného pasážování. Buňky jsme kultivovaly v kolagenním gelu a na plastu v kultivačním médiu s přídavkem růstového faktoru. Po kultivaci jsme z buněk izolovali celkovou RNA, která byla převedena pomocí reverzní transkriptázy na cDNA. Expresi genů jsme stanovili pomocí rtRT-PCR. Data jsme statisticky zpracovali pomocí Studentova t-testu. Z experimentu vyplynulo, že kultivační prostředí má zásadní vliv na kultivované myofibroblasty a že FGF-1 ovlivňuje expresi genů v jaterních myofibroblastech. Naše práce přinesla i poznatek, že exprese genů buněk kultivovaných s FGF-1 a buněk kultivovaných s FGF-1 a heparinem, se liší. Zaměřili jsme se na změny v expresi genů matrix metaloproteinázy 9, matrix metaloproteinázy 13 a osteopontinu	cze
dc.description.abstract-translated	The liver tissue consists of several types of cells. Liver injury leads to fibrosis of the necrotic tissue induced by hepatic stellate cells (HSC) and portal myofibroblasts. We have studied the influence of the fibroblast growth factor FGF-1 on the expression of certain genes in hepatic myofibroblasts. In the first part of the experiment, we compared the gene expression in cells growing on polystyrene Petri dishes (2D culture) and in cells embedded in collagen gel(3D culture), after a 12-hour exposition to the growth factor FGF-1. In the second part, we studied the interaction between FGF-1 and heparin. The cells were isolated from the fraction of non-parenchymal liver cells of Sprague- Dawley rats by repeated passaging. After harvesting the cells total cellular RNA was isolated and translated into cDNA using the reverse transcriptase. We used rtRT-PCR to evaluate gene expression. We focused on the changes of gene expression of matrix metalloproteinase 9, matrix metalloproteinase 13 and osteopontin. The data was statistically analysed by Student´s t-test. The experiments showed that the cellular environment has crucial influence on hepatic myofibroblasts in vitro and that FGF-1 affects gene expression in these cells. The largest changes were found in the expression of matrix metaloproteinase 13.	eng
dc.description.defence	1. Prezentace výsledků diplomové práce. 2. Diskuze k posudkům vedoucího a oponenta diplomové práce. 3. Diplomantka zodpověděla všechny dotazy a připomínky k DP.	cze
dc.description.department	Katedra biologických a biochemických věd	cze
dc.description.grade	Dokončená práce s úspěšnou obhajobou	cze
dc.format	74 s.	cze
dc.format.extent	2466776 bytes	cze
dc.format.mimetype	application/pdf	cze
dc.identifier	Univerzitní knihovna (sklad)	cze
dc.identifier.signature	D23682
dc.identifier.uri	https://hdl.handle.net/10195/38817
dc.language.iso	cze
dc.publisher	Univerzita Pardubice	cze
dc.rights	pouze v rámci univerzity	cze
dc.subject	jaterní myofibroblasty	cze
dc.subject	exprese genů	cze
dc.subject	jaterní fibróza	cze
dc.subject	hepatic myofibroblasts	eng
dc.subject	gene expression	eng
dc.subject	liver fibrosis	eng
dc.thesis.degree-discipline	Analýza biologických materiálů	cze
dc.thesis.degree-grantor	Univerzita Pardubice. Fakulta chemicko-technologická	cze
dc.thesis.degree-name	Mgr.	cze
dc.thesis.degree-program	Speciální chemicko-biologické obory	cze
dc.title	Vliv růstových faktorů na expresi genů v jaterních myofibroblastech potkanů	cze
dc.title.alternative	The effect of growth factors on gene expression in rat liver myofibroblasts	eng
dc.type	diplomová práce	cze
dspace.entity.type	Publication