Imobilizace lysozymu na magnetické mikročástice pro účely obohacení bakteriálních extraktů určených k identifikaci mikroorganismů

Holubová, Lucie

Publikace:
Imobilizace lysozymu na magnetické mikročástice pro účely obohacení bakteriálních extraktů určených k identifikaci mikroorganismů

Diplomová práceOmezený přístup

dc.contributor.advisor	Korecká, Lucie	cze
dc.contributor.author	Holubová, Lucie
dc.date.accepted	2010	cze
dc.date.accessioned	2010-07-03T14:57:06Z
dc.date.available	2010-07-03T14:57:06Z
dc.date.issued	2010
dc.description.abstract	Diplomová práce byla zaměřena na vytipování a zavedení vhodné metody pro stanovení aktivity solubilního lysozymu, přípravu magnetického nosiče s imobilizovaným lysozymem a moţnost praktického vyuţití jak solubilní tak imobilizované formy lysozymu pro fragmentaci buněčné stěny grampozitivních bakterií. Aktivita solubilního a následně imobilizovaného lysozymu, stejně jako optimalizace reakčních podmínek byla provedena s vyuţitím různých druhů syntetických substrátů, ze kterých se pro naše účely nejlépe osvědčil fluorescenční substrát 4-methylumbelliferyl-ß-D-N,N´,N´´-triacetylchitotriosid. Pro přípravu bioaktivního nosiče vyuţitelného k fragmentaci buněčné stěny grampozitivních bakterií byly vybrány magnetické částice s karboxylovými a hydroxylovými funkčními skupinami s rozdílnou velikostí částic a porozitou. Na základě výsledků byl vybrán nejvhodnější nosič, u kterého byla stanovena skladovací a operační stabilita imobilizovaného lysozymu. Obě formy enzymu byly následně pouţity k fragmentaci buněčné stěny bakterií s následnou identifikací pomocí MALDI - TOF MS.	cze
dc.description.abstract-translated	Diploma thesis was focused on prediction and implementation of suitable method for the determination of the activity of soluble lysozyme, preparation of magnetic carrier with immobilized lysozyme and the possibility of practical utilization of soluble and immobilized forms of lysozyme for fragmentation of the cell wall of grampositive bacteria. The activity of soluble lysozyme and subsequently immobilized lysozyme, as well as an optimization of reaction conditions has been performed using various types of synthetic substrates, from which the fluorescent substrate 4-methylumbelliferyl-ß-D-N,N',N''-triacetylchitotriosid was the most beneficial for our purposes. Magnetic particles with carboxyl and hydroxyl functional groups of different size of particles and porosity were chosen for preparation of the bioactive carrier subsequently used for fragmentation of the cell wall of grampositive bacteria. Based on the results, the most convenient carrier has been selected, in which the storage and operational stability of immobilized lysozyme was determined. Both forms of enzyme were subsequently used to fragmentation of cell walls bacteria for identification by MALDI - TOF MS analysis.	eng
dc.description.defence	1. Prezentace výsledků diplomové práce 2. Diskuze k posudkům vedoucího a oponenta diplomové práce 3. Diplomantka zodpověděla všechny dotazy a připomínky k DP	cze
dc.description.department	Katedra biologických a biochemických věd	cze
dc.description.grade	Dokončená práce s úspěšnou obhajobou	cze
dc.format	103 s.	cze
dc.format.extent	2623053 bytes	cze
dc.format.mimetype	application/pdf	cze
dc.identifier	Univerzitní knihovna (sklad)	cze
dc.identifier.signature	D21791	cze
dc.identifier.signature	D21791
dc.identifier.uri	https://hdl.handle.net/10195/36723
dc.language.iso	cze
dc.publisher	Univerzita Pardubice	cze
dc.rights	Práce není přístupná	cze
dc.subject	lysozym	cze
dc.subject	imobilizace	cze
dc.subject	magnetické nosiče	cze
dc.subject	buněčná stěna	cze
dc.subject	MALDI - TOF MS identifikace bakterií	cze
dc.subject	lysozyme	eng
dc.subject	immobilization	eng
dc.subject	magnetic carriers	eng
dc.subject	cell walls	eng
dc.subject	MALDI - TOF MS identification of bacteria	eng
dc.thesis.degree-discipline	Analýza biologických materiálů	cze
dc.thesis.degree-grantor	Univerzita Pardubice. Fakulta chemicko-technologická	cze
dc.thesis.degree-name	Mgr.	cze
dc.thesis.degree-program	Speciální chemicko-biologické obory	cze
dc.title	Imobilizace lysozymu na magnetické mikročástice pro účely obohacení bakteriálních extraktů určených k identifikaci mikroorganismů	cze
dc.title.alternative	Immobilization of lysozyme onto magnetic microparticles for the purpose of bacterial extracts enrichment aimed at an identification of microorganisms	eng
dc.type	diplomová práce	cze
dspace.entity.type	Publication