Digitální knihovnaUPCE
 

Stanovení glutathiondisulfidu v plné krvi pomocí HPLC s fluorescenční detekcí

Diplomová práce
dc.contributor.advisorKanďár, Roman
dc.contributor.authorČandová, Jarmila
dc.contributor.refereeČegan, Alexandr
dc.date.accepted2011
dc.date.accessioned2011-06-01T13:19:52Z
dc.date.available2011-06-01T13:19:52Z
dc.date.issued2011
dc.description.abstractPorušení rovnováhy mezi prooxidačními a antioxidačními pochody v buňkách vede k oxidačnímu stresu. Významný podíl na udrţení této rovnováhy má glutathion. Tento nejhojněji zastoupený antioxidant se v buňkách vyskytuje převáţně v redukované formě. Působením oxidačních pochodů dochází k jeho přeměně na glutathiondisulfid. Důleţitým ukazatelem oxidačního stresu je poměr glutathiondisulfidu ke glutathionu. V této diplomové práci jsme se zaměřili na vypracování postupu pro stanovení glutathiondisulfidu v plné krvi a plazmě metodou vysokoúčinné kapalinové chromatografie s fluorescenční detekcí. Při přípravě vzorku jsme dbali především na to, abychom v maximální moţné míře zabránili oxidaci glutathionu. Tento postup zahrnuje odběr krevních vzorků do zkumavek obsahujících citrát sodný a kyselinu citronovou (pH 4,2), přídavek alkylačního činidla (N-ethylmaleimidu) ihned po odběru a precipitaci proteinů 15% kyselinou trichloroctovou. Vzorky, které nelze zpracovat a analyzovat ihned, musí být ošetřeny N-ethylmaleimidem ještě před skladováním.cze
dc.description.abstract-translatedThe imbalance between oxidizing and anti-oxidizing processes in cells leads to oxidative stress. Glutathione participates in maintaining of the balance. The most abundant antioxidant in cells occurs predominantly in reduced form. Action of oxidation processes leads to its conversion to glutathione disulfide. An important indicator of an oxidative stress is the ratio of glutathione disulfide to glutathione. In this thesis we focused on developing procedures for the determination of glutathione disulfide in whole blood and plasma by a high-performance liquid chromatography with fluorescence detection. During the sample preparation, we tried to prevent glutathione oxidation. This procedure involved: a collection of blood samples into tubes containing sodium citrate and citric acid (pH 4.2), an addition of alkylation reagent (N-ethylmaleimide) immediately after collection, a protein precipitation by 15% trichloroacetic acid. Samples which cannot be processed and analyzed immediately, must be treated by N-ethylmaleimide before storage.cze
dc.description.defence1) Prezentace výsledků diplomové práce 2) Diskuze k posudkům vedoucího a oponenta diplomové práce 3) Diplomantka zodpověděla všechny dotazy a připomínky k diplomové prácecze
dc.description.departmentKatedra biologických a biochemických vědcze
dc.description.gradeDokončená práce s úspěšnou obhajoboucze
dc.format78 s.cze
dc.format.extent989140 bytes
dc.format.mimetypeapplication/pdf
dc.identifierUniverzitní knihovna (sklad)cze
dc.identifier.signatureD23703
dc.identifier.urihttp://hdl.handle.net/10195/38725
dc.language.isocze
dc.publisherUniverzita Pardubicecze
dc.rights1. část (pouze v rámci univerzity); 2. část (nepřístupný soubor)cze
dc.subjectoxidační strescze
dc.subjectglutathioncze
dc.subjectglutathiondisulfidcze
dc.subjectvysokoúčinná kapalinová chromatografiecze
dc.subjectfluorescenční detekcecze
dc.subjectstanovení glutathiondisulfiducze
dc.subjectoxidative stresseng
dc.subjectglutathioneeng
dc.subjectglutathione disulfideeng
dc.subjecthigh-performance liquid chromatographyeng
dc.subjectfluorescence detectioneng
dc.subjectdetermination of glutathione disulfideeng
dc.thesis.degree-disciplineAnalýza biologických materiálůcze
dc.thesis.degree-grantorUniverzita Pardubice. Fakulta chemicko-technologickácze
dc.thesis.degree-nameMgr.
dc.thesis.degree-programSpeciální chemicko-biologické oborycze
dc.titleStanovení glutathiondisulfidu v plné krvi pomocí HPLC s fluorescenční detekcícze
dc.title.alternativeDetermination of whole blood glutathione disulfide using an HPLC with fluorescence detectioneng
dc.typediplomová prácecze

Soubory

Původní svazek

Nyní se zobrazuje 1 - 3 z 3
Náhled není k dispozici
Název:
CandovaJ_StanoveniGlutathiondisulfidu_1.cast_RK_2011.pdf
Velikost:
965.96 KB
Formát:
Adobe Portable Document Format
Náhled není k dispozici
Název:
KandarR_StanoveniGlutathiondisulfidu_JC_2011.pdf
Velikost:
502.91 KB
Formát:
Adobe Portable Document Format
Náhled není k dispozici
Název:
CeganA_StanoveniGlutathiondisulfidu_JC_2011.pdf
Velikost:
890.48 KB
Formát:
Adobe Portable Document Format