Přístup k e-verzi:Plný text práce a teze v angličtině jsou přístupné bez omezení. Přílohy (publikační činnost doktoranda) jsou přístupné pouze v rámci univerzity.
Studijní obor:Analytická chemie
Abstrakt:
Studium živých organismů bylo vždy zájmem vědeckých oborů a v dnešní době tomu
není jinak. S moderními přístupy se otevírají nové možnosti, což souvisí i se značným
rozmachem tzv. "omics" metod, kam patří například genomika, proteomika, metabolomika
nebo glykomika. Lipidomika je nejmladším podoborem metabolomiky a zaměřuje se na
analýzu lipidů v živých organismech. Lipidy jsou rozsáhlou skupinou přírodních látek, které
jsou obsaženy v rostlinách, houbách, bakteriích nebo v těle živočichů, kde plní životně důležité
funkce. Hmotnostní spektrometrie je nejpoužívanější technikou v kvalitativní i kvantitativní
analýze lipidů.
V teoretické části této práce jsou popsány základní poznatky o lipidech, současné
názvosloví a biologické funkce v živých organismech. Současně je vysvětlena lipidomická
analýza od přípravy vzorků až po nástroje využívané ke zpracování naměřených dat. Zvláštní
pozornost je věnována principům chromatografických technik a využití jejich spojení
s hmotnostní spektrometrií v lipidomické analýze, kdy jsou kromě výhod a limitací shrnuty také
zásady pro kvalitativní a kvantitativní analýzu. Literární rešerše poté ukazuje potenciál lipidů
pro diagnostiku různých typů onemocnění a přínos derivatizačních postupů v lipidomické
analýze.
V experimentální části je diskutován vývoj nových metod pro analýzu lipidů v tělních
tekutinách s využitím spojení chromatografických technik a hmotnostní spektrometrie. V této
práci jsou použity dva přístupy využívané v lipidomické analýze, separace lipidů dle lipidových
druhů pomocí kapalinové chromatografie s obrácenými fázemi a separace dle lipidových tříd
pomocí hydrofilní interakční chromatografie a superkritické fluidní chromatografie. Separace
lipidů dle lipidových druhů je aplikována pro kvalitativní popis lidské plazmy s využitím
klasického i derivatizačního přístupu, naopak metody založené na separaci dle lipidových tříd
jsou využity pro kvantitativní analýzu velkého množství vzorků a pomocí statistických nástrojů
jsou porovnávány lipidové profily zdravých jedinců a pacientů s diagnostikovanou rakovinou.