Tato diplomová práce se zabývá rozhraními používaných ve dvoudimenzionální kapalinové chromatografii (2D-LC). V rámci teoretické části byla vypracována rešerše na téma dvoudimenzionální kapalinové chromatografie se zaměřením na instrumentaci, gradienty mobilních fází a zejména pak na používaná rozhraní. V experimentální části pak byla provedena série 2D analýz s cílem otestovat nové rozhraní s třemi smyčkami, které bude umožňovat zařazení izoelektrické fokusace sloučenin ve frakcích v průběhu analýzy mezi první a druhou dimenzí 2D systému. Toto rozhraní bylo porovnáváno s běžně používaným rozhraním Agilent-2-port-8-duo a na něm založeného rozhraní s aktivní modulací rozpouštědla (ASM).