| dc.contributor.advisor |
Bílková, Zuzana |
|
| dc.contributor.author |
Hemalová, Kateřina
|
|
| dc.date.accessioned |
2020-09-16T14:33:08Z |
|
| dc.date.available |
2020-09-16T14:33:08Z |
|
| dc.date.issued |
2020 |
|
| dc.date.submitted |
2020-07-01 |
|
| dc.identifier.uri |
https://hdl.handle.net/10195/76613 |
|
| dc.description.abstract |
Tato diplomová práce je zaměřená na izolaci rekombinantních proteinůspolyhistidinovou kotvouze směsi proteinů pomocí afinitní chromatografie na imobilizovaných iontech kovůa na TiO2nanotrubicích pokrytých Fe3O4nanočásticemi (TiO2NTs@Fe3O4NPs). Cílem práce bylooptimalizovat protokol izolace pomocí nanotrubicza standardních i denaturačních podmínek. Úspěšnost izolace byla vždy ověřena pomocí gelové elektroforézy.Další klíčovousoučástí práce bylozavedení metody detekce lipopolysacharidůvelučních frakcích zizolacía ověření, zda je možné lipopolysacharidy efektivně odstranit již při obohacení rekombinantních proteinů.Provlastnístanoveníbyl použita optimalizovánkomerčně dodávaný LAL test. Podařilo se dokázat, žeTiO2 nanotrubice jsou při izolacích selektivnějším nosičem než IMAC nosič. To bohuželneplatí při odstranění LPS, kdy IMAC nosiče LPS nevážou za standardních ani denaturačních podmínek. TiO2 nanotrubice nevážou LPS pouze za denaturačních podmínek. |
cze |
| dc.format |
99 s. |
|
| dc.language.iso |
cze |
|
| dc.publisher |
Univerzita Pardubice |
cze |
| dc.rights |
Bez omezení |
|
| dc.subject |
rekombinantní protein |
cze |
| dc.subject |
afinitní kotva |
cze |
| dc.subject |
magnetické nanočástice |
cze |
| dc.subject |
lipopolysacharidy |
cze |
| dc.subject |
LAL test |
cze |
| dc.subject |
recombinant protein |
eng |
| dc.subject |
affinity tag |
eng |
| dc.subject |
magnetic nanoparticles |
eng |
| dc.subject |
lipopolysaccharides |
eng |
| dc.title |
Metoda izolace His-tag proteinů pomocí TiO2/Fe3O4 s důrazem na čistotu finálního produktu |
cze |
| dc.title.alternative |
Isolation of His-Tag Proteins by TiO2/Fe3O4 Solid Phase With the Impact to the Purity of Final Product |
eng |
| dc.type |
diplomová práce |
cze |
| dc.date.accepted |
2020-09-09 |
|
| dc.description.abstract-translated |
This thesis is focused on isolation of proteinswith polyhistidine tag from a mixture of proteins withimmobilized metal affinity chromatographyand TiO2nanoparticlesdecorated with Fe3O4 nanoparticles (TiO2NTs@Fe3O4NPs). Target of this thesis was to optimize protocol of isolation with TiO2nanoparticles under standard and denaturingconditions. Success of isolation was always verified by gelelectrophoresis.Nextimportantpart of this thesis wasimplementation of method to detect lipopolysaccharidesin elution fractionsfrom isolationsand verification ifit is possible to effectively remove lipopolysaccharides during the enrichment of recombinant proteins.Acommercially available LAL test was used and optimized for the determination. TiO2nanotubes have been shown to be a more selective carrier than IMAC carriers in isolations. Unfortunately, this does not apply to LPS removal, where IMAC carriers does not bind LPS under standard or denaturingconditions. TiO2nanotubes do not bind LPS only under denaturing conditions. |
eng |
| dc.description.department |
Fakulta chemicko-technologická |
cze |
| dc.thesis.degree-discipline |
Bioanalytik |
cze |
| dc.thesis.degree-name |
Mgr. |
|
| dc.thesis.degree-grantor |
Univerzita Pardubice. Fakulta chemicko-technologická |
cze |
| dc.thesis.degree-program |
Speciální chemicko-biologické obory |
cze |
| dc.description.defence |
1/ Prezentace výsledků diplomové práce.
2/ Diskuze k posudkům vedoucího a oponenta diplomové práce.
3/ Studentka zodpověděla všechny dotazy a připomínky k DP. |
cze |
| dc.identifier.stag |
39784 |
|
| dc.description.grade |
Dokončená práce s úspěšnou obhajobou |
cze |
