V této diplomové práci je optimalizováno kvantitativní stanovení kyseliny hyaluronové ve farmaceutických výrobcích pomocí kapalinové chromatografie ve spojení s hmotnostní spektrometrií či fluorescenční detekcí. Jsou podrobně popsány hyaluronidázy, jejich typy a mechanismus štěpení. Fragmentace byla provedena enzymem bakteriální hyaluronanlyáza a účinnost ověřena spektrofotometricky. Práce se zaměřuje na derivatizaci hyaluronanových fragmentů pomocí 2-aminoakridonu a jejich následnou chromatografickou separaci v systémech s obrácenými fázemi. V práci jsou uvedeny další chromatografické, elektroforetické a spektrální metody ke stanovení hyaluronanu. Zahrnuto je i aktuální využití, výroba a unikátní vlastnosti této látky.