Analýza proteinů s využitím imobilizovaného Clostripainu a techniky Selected Reaction Monitoring (SRM)
Diplomová práceDatum publikování
2013
Autoři
Vedoucí práce
Oponent
Název časopisu
Název svazku
Vydavatel
Univerzita Pardubice
Abstrakt
Diplomová práce se zabývá imobilizací proteolytického enzymu Clostripainu na vhodný magnetický nosič a jeho následnou aplikací pro štěpení proteinů v rámci hmotnostně-spektrometrické techniky monitorování vybraných reakcí (SRM). Testovány byly různé magnetické částice lišící se velikostí, porozitou či funkčními skupinami na svém povrchu. Na základě stanovení aktivity byly pro následné štěpení vybrány nosiče, na které bylo navázáno nejvíce enzymu. Pro štěpení byly zvoleny sérový bovinní albumin jako modelový protein a ricin jako konkrétní proteinový toxin. Štěpení bylo pro srovnání prováděno také trypsinem a oba enzymy byly testovány jak v solubilní tak imobilizované formě. Výsledné peptidové fragmenty byly analyzovány pomocí SDS-PAGE a následně byly kvantifikovány pomocí hmotnostního analyzátoru 4000 QTRAP.
Rozsah stran
108 s.
ISSN
Trvalý odkaz na tento záznam
Projekt
Zdrojový dokument
Vydavatelská verze
Přístup k e-verzi
Pouze v rámci univerzity
Název akce
ISBN
Studijní obor
Analýza biologických materiálů
Studijní program
Speciální chemicko-biologické obory
Signatura tištěné verze
D30285
Umístění tištěné verze
Univerzitní knihovna (studovna)
Přístup k tištěné verzi
Klíčová slova
SRM technika, magnetické částice, Clostripain, magnetic beads, immobilization, proteolysis, SRM technique, ricin, imobilizace, proteolýza