| dc.contributor.advisor |
Korecká, Lucie |
|
| dc.contributor.author |
Hrachovcová, Kateřina |
|
| dc.date.accessioned |
2013-07-20T01:55:13Z |
|
| dc.date.available |
2013-07-20T01:55:13Z |
|
| dc.date.issued |
2013 |
|
| dc.identifier |
Univerzitní knihovna (studovna) |
cze |
| dc.identifier.uri |
http://hdl.handle.net/10195/52283 |
|
| dc.description.abstract |
Předmětem diplomové práce byla příprava nanočástic pro amplifikaci signálu při elektrochemické detekci. Vlastní zesílení signálu zajišťuje křenová peroxidáza (HRP), která označí sekundární protilátku (Ab2). Pro přípravu nanočástic byly jako materiály použity kyselina hyaluronová (HA) a silika. Mesopóry silika nanočástic umožní vazbu více molekul HRP a případně i vazbu mediátoru, který zesiluje signál, proto byl tento materiál zvolen pro přípravu nanočástic. Mesoporézní silika nanočástice byly připraveny z tetraortosilikátu (TEOS) reakcí s hexadecyltrimethylammonium bromidem (CTAB). Kyselina hyaluronová byla zvolena výchozím materiálem pro přípravu nanočástic z důvodu jednoduché přípravy. Vlivem přítomnosti velkého množství funkčních COOH skupin v molekule HA je možné předpokládat vysokou účinnost vazby a současně zesítěním vznik porézní sítě. Metoda je založena na kovaletním zesítění tzv. cross-linked reakci, kdy se karboxylové funkční skupiny HA aktivují karbodiimidem (EDC) a poté pomocí -NH2 skupin bis-(3-aminopropyl) aminu (BAPA) dojde k provázání HA řetězce. Připravené nanočástice byly charakterizovány měřením jejich velikosti a
zeta potenciálu. Tvar a povrch připravených nanočástic byl zjištěn pomocí skenovacího elektronového mikroskopu. Účinnost vazby HRP byla ověřena elektroforetickou separací s následným barvením roztokem amoniakálního stříbra či alcianovou modří. |
cze |
| dc.format |
89 s. |
cze |
| dc.format.extent |
2904449 bytes |
cze |
| dc.format.mimetype |
application/pdf |
cze |
| dc.language.iso |
cze |
|
| dc.publisher |
Univerzita Pardubice |
cze |
| dc.rights |
Pouze v rámci univerzity |
cze |
| dc.subject |
mesoporézní silika nanočástice |
cze |
| dc.subject |
nanočástice z kyseliny hyaluronové |
cze |
| dc.subject |
křenová peroxidáza |
cze |
| dc.subject |
amplifikace signálu |
cze |
| dc.subject |
elektrochemická detekce |
cze |
| dc.subject |
mesoporous silica nanoparticles |
eng |
| dc.subject |
nanoparticles of hyaluronic acid |
eng |
| dc.subject |
horseradish peroxidase |
eng |
| dc.subject |
signal amplification |
eng |
| dc.subject |
electrochemical detection |
eng |
| dc.title |
Příprava nanočástic pro amplifikaci signálu při elektrochemické detekci |
cze |
| dc.title.alternative |
Preparation of nanoparticles for electrochemical detection signal amplification |
eng |
| dc.type |
diplomová práce |
cze |
| dc.contributor.referee |
Kučerová, Jana |
|
| dc.date.accepted |
2013 |
|
| dc.description.abstract-translated |
The subject of this thesis was the preparation of nanoparticles for signal amplification during electrochemical detection. Own signal amplification ensures horseradish peroxidase (HRP), which marks the secondary antibody (Ab2).
For the preparation of nanoparticles hyaluronic acid (HA) and silica were used as materials. Mesopores of silica nanoparticles enable to bind more molecules of HRP or also the electron mediator which amplifies the signal, so this material was chosen for the preparation of nanoparticles. Mesoporous silica nanoparticles were made of tetraortosilicate (TEOS) by reaction with hexadecyltrimethylammonium bromide (CTAB).
Hyaluronic acid was used for the preparation of the nanoparticles due to simple procedure of synthesis. Due to the presence of large amounts of functional -COOH groups, the HA is expected to be highly effective in binding and cross-linking, which leads to formation of porous network. The method is based on a covalent crosslinking, when carboxyl functional groups of HA activated with N-(3-dimethylaminopropyl)-N'-ethylcarbodiimide hydrochloride (EDC) and in presence of - NH2 groups of bis-(3-aminopropyl) amine (BAPA) cause linking of HA chain. Prepared nanoparticles were characterized by measuring of particle size and zeta potential. The shape and surface of the prepared nanoparticles was controlled by scanning electron microscopy. HRP was immobilized onto the prepared nanoparticles with following verification of binding efficiency by electrophoretic separation with silver or alcian blue staining. |
eng |
| dc.description.department |
Katedra biologických a biochemických věd |
cze |
| dc.thesis.degree-discipline |
Analýza biologických materiálů |
cze |
| dc.thesis.degree-name |
Mgr. |
cze |
| dc.thesis.degree-grantor |
Univerzita Pardubice. Fakulta chemicko-technologická |
cze |
| dc.identifier.signature |
D27970 |
cze |
| dc.thesis.degree-program |
Speciální chemicko-biologické obory |
cze |
| dc.description.defence |
1. Prezentace výsledků diplomové práce
2. Diskuze k posudkům vedoucího a oponenta diplomové práce
3. Diplomantka zodpověděla všechny dotazy a připomínky k DP |
cze |
| dc.identifier.stag |
20486 |
cze |
| dc.description.grade |
Dokončená práce s úspěšnou obhajobou |
cze |
