| dc.contributor.advisor |
Šimšová, Marcela |
|
| dc.contributor.author |
Čapková, Martina
|
|
| dc.date.accessioned |
2009-07-03T14:10:22Z |
|
| dc.date.available |
2009-07-03T14:10:22Z |
|
| dc.date.issued |
2009 |
|
| dc.identifier |
Univerzitní knihovna (sklad) |
cze |
| dc.identifier.uri |
http://hdl.handle.net/10195/34409 |
|
| dc.description.abstract |
Nedávno publikované studie ukazují, že proteiny membránového bakteriálního komplexu DsbA-DsbB mají přímý vztah k virulenci mikroba (Inaba and Ito, 2008). Předkládaná práce je zaměřena na studium topologie jednoho z těchto lipoproteinů Franciselle tulransis (F. tularensis subtyp tularensis), označovaného jako lipoprotein FTT1103 (gi 56708183, teoretická Mh 38 721 Da, pI 5.23) s DsbA doménou. Metodami genového inženýrství byla, pro ověření výsledků predikčních algoritmů, připravena sada vektorů pro expresi jak fúzních rekombinantních proteinů, tak i volných forem FTT1103. Expresní vektory byly vytvořeny klonováním genu pro FTT1103 a reportérového genu pro periplazmaticky aktivní enzym alkalickou fosfatázu (PhoA). K určení lokalizace lipoproteinu v Escherichia coli (E. coli) byla využita právě přirozená enzymatická aktivita PhoA při sekreci proteinů do periplazmatického prostoru díky přítomnosti funkčního N-koncového signálního peptidu. Připravené vektory byly použity pro expresi, následnou detekci proteinů a jejich enzymatické aktivity v modelovém organismu E.coli. Na základě získaných poznatků byl navržen topologický model proteinu FTT1103. |
cze |
| dc.format |
67 s. |
cze |
| dc.format.extent |
680837 bytes |
|
| dc.format.mimetype |
application/pdf |
|
| dc.language.iso |
cze |
|
| dc.publisher |
Univerzita Pardubice |
cze |
| dc.rights |
Bez omezení |
cze |
| dc.subject |
phusion protein |
eng |
| dc.subject |
alkaline phosphatise |
eng |
| dc.subject |
Francisella tularensis |
cze |
| dc.subject |
proteinová topologie |
cze |
| dc.subject |
alkalická fosfatáza |
cze |
| dc.title |
Studium membránové lokalizace konservovaného hypotetického lipoproteinu bakterie Francisella tularensis s využitím molekulárně-biologických metod |
cze |
| dc.type |
diplomová práce |
cze |
| dc.date.accepted |
2009 |
|
| dc.description.abstract-translated |
Recently was published, that Francisella tularensis proteins in membrane compartment have direct relation to the microbe pathogenicity. The referred diploma thesis is focused on FTT1103 lipoprotein topology study. There was prepared a set of vectors for expression of phusion recombinant proteins as well as their free variants by using of genetic engeneering methods to validate data in bioinformatic study. Expression vectors were prepared by "in frame" cloning of FTT1103 gene and reporter gene for periplasmatically active enzyme alkaline phosphatase (PhoA). Activity of PhoA due to enzyme secretion into periplasmatic space in the presence of functionally active N-terminal signal sequence was used to determine lipoprotein localization in Escherichia coli (E. coli). The vectors were used for expression, protein detection and enzymatic activity prediction in a model organism of E. coli. Based on research data the topology model was proposed. |
eng |
| dc.description.department |
Katedra biologických a biochemických věd |
cze |
| dc.thesis.degree-discipline |
Analýza biologických materiálů |
cze |
| dc.thesis.degree-name |
Mgr. |
cze |
| dc.thesis.degree-grantor |
Univerzita Pardubice. Fakulta chemicko-technologická |
cze |
| dc.identifier.signature |
D20329 |
|
| dc.thesis.degree-program |
Speciální chemicko-biologické obory |
cze |
| dc.description.grade |
Dokončená práce s úspěšnou obhajobou |
cze |
