Stanovení aminokyselin s rozvětveným řetězcem pomocí HPLC s fluorimetrickou detekcí
Diplomová práceStatus neznámý Náhled není k dispozici
Datum publikování
2008
Autoři
Vedoucí práce
Oponent
Název časopisu
Název svazku
Vydavatel
Univerzita Pardubice
Abstrakt
Stanovení aminokyselin s rozvětveným řetězcem (valinu, leucinu a isoleucinu), methioninu, fenylalaninu a tyrosinu je v současné době nejspolehlivějším přístupem pro diagnostiku nemoci javorového sirupu, hypermethioninemie, fenylketonurie a tyrosinemie. Byla vyvinuta HPLC metoda pro stanovení aminokyselin s rozvětveným řetězcem, methioninu, fenylalaninu a tyrosinu v plazmě a plné krvi. Před separací jsme provedli derivatizaci těchto aminokyselin pomocí o ftaldialdehydu. Pro separaci jsme použili chromatografickou kolonu LiChroCart 125 4 Purospher RP 18e, 5 ?m. Efluent byl monitorován pomocí fluorescenčního detektoru. Jako mobilní fázi A jsme použili 25 mmol/l Na2HPO4 - methanol (90:10, v/v), pH 6,5?0,1, jako B 100% methanol. Analytické parametry metody byly vyhovující pro všechny stanovované aminokyseliny. Kalibrační křivka byla lineární v celém rozsahu testovaných koncentrací. Orientační hodnoty u skupiny dobrovolných dárců krve byly 231,69 36,12 ?mol/l pro valin, 191,55 35,03 ?mol/l pro leucin, 55,34 10,79 ?mol/l pro isoleucin, 37,26 35,71 ?mol/l pro methionin, 73,17 10,01 ?mol/l pro fenylalanin a 51,08 11,87 ?mol/l pro tyrosin. Orientační hodnoty u novorozenců byly 166,34 40,01 ?mol/l pro valin, 139,84 31,36 ?mol/l pro leucin, 51,08 13,02 ?mol/l pro isoleucin, 22,06 4,70 ?mol/l pro methionin, 71,79 15,39 ?mol/l pro fenylalanin a 127,75 31,78 ?mol/l pro tyrosin. Vyvinuli jsme jednoduchou, relativně rychlou a selektivní HPLC metodu s fluorimetrickou detekcí pro stanovení aminokyselin s rozvětveným řetězcem, methioninu, fenylalaninu a tyrosinu v plazmě a suché krevní skvrně. Prezentovaná metoda je citlivá, přesná a správná pro vyšetřované vzorky a je vhodná jak pro výzkumné účely, tak také pro klinickou praxi.
Rozsah stran
91 s.
ISSN
Trvalý odkaz na tento záznam
Projekt
Zdrojový dokument
Vydavatelská verze
Přístup k e-verzi
Název akce
ISBN
Studijní obor
Analýza biologických materiálů
Studijní program
Speciální chemicko-biologické obory
Signatura tištěné verze
D18034
Umístění tištěné verze
Univerzitní knihovna (sklad)
Přístup k tištěné verzi
Klíčová slova
valine, leucine, isoleucine, methionine, phenylalanine, tyrosine, maple syrup urine disease, hypermethioninemia, phenylketonuria, tyrosinemia, fluorescence detection, valin, leucin, isoleucin, methionin, fenylalanin, tyrosin, nemoc javorového sirupu, hypermethioninemie, fenylketonurie, tyrosinemie, HPLC, fluorimetrická detekce