Diagnostika adrenoleukodystrofie pomocí plynové chromatografie

Abstract

Diplomová práce je zaměřena na diagnostiku adrenoleukodystrofie. Jedná se o onemocnění lipidového metabolismu, které je doprovázeno poruchou peroxizomální -oxidace a následnou akumulací VLCFA v plazmě a tkáních. Z pohledu biochemie, diagnostika této nemoci spočívá především ve stanovení VLCFA. Cílem této práce je potvrdit dosavadní biochemickou diagnostiku a zároveň nalézt nové účinné diagnostické markery. Pro analýzu byla nejprve použita tenkovrstvá chromatografie, pomocí které byly analyzované vzorky rozděleny do pěti lipidových tříd: PL, DG, FFS, TG a CE. Následně bylo stanoveno množství jednotlivých mastných kyselin ve zmíněných frakcích plynovou chromatografií. Analýza byla prováděna v plazmě a poté v dílčích lipoproteinech VLDL, LDL a HDL. Pro tuto studii byly použity tři vzorky plazmy od sourozenců z chorvatské rodiny, u nichž se v různé míře projevilo onemocnění adrenoleukodystrofie. Dále bylo zpracováno deset vzorků plazmy od zdravých dobrovolných dárců ve stejném věkovém rozmezí jako pacienti. Na základě stěžejních biochemických diagnostických markerů byla u studovaných sourozenců potvrzena diagnóza adrenoleukodystrofie. Bylo prokázáno, že naměřené hodnoty VLCFA i esenciálních FA korelovaly s věkem chlapců a s ním souvisejícím stupněm onemocnění. Dále bylo zjištěno velmi výrazné zvýšení omega-6 a omega-3 FA u chlapce s nejvíce rozvinutou adrenoleukodystrofií ve frakci PL, přičemž tento nález může mít vliv na poškození membrán, a to především v mozku a nadledvinách. Nebyla nalezena žádná shoda mezi aktivitou lipogenních enzymů a onemocněním.