GC/MS stanovení methylesterů mastných kyselin v biologických vzorcích

Abstract

Mastné kyseliny jsou základními stavebními součástmi všech komplexních lipidových molekul a k jejich skeletu jsou vázány převážně esterovými vazbami. Lipidy se jako takové vyskytují ve všech živých organismech. Proto je jasné, že bylo třeba pro takto rozsáhlou skupinu biomolekul vyvinout přesnou, rychlou a zároveň robustní analytickou metodu, která by byla využitelná pro kvalitativní i kvantitativní analýzu. Profilování mastných kyselin za pomocí plynové chromatografie s plamenově ionizačním detektorem je již po desetiletí zlatým standardem tohoto druhu analýz jak v analytické tak klinické praxi. V této práci bylo ovšem použito spojení plynové chromatografie s kvadrupólovým hmotnostním analyzátorem s elektronovou ionizací, protože tento druh detekce nabízí podstatně větší možnosti v oblasti identifikace molekul. Mastné kyseliny byly transesterifikovány z celkového lipidového extraktu pomocí methanoátu sodného a vznikly methylestery, které byly poté analyzovány. V práci je uvedena také optimalizace metody se všemi jejími parametry jako teplotní program, splitovací poměr, objem nástřiku a průtok nosného plynu. Konečně je diskutována interpretace hmotnostních spekter a statisticky zhodnoceno měření methylesterů mastných kyselin v lidských biologických vzorcích.