Využití průtokové cytometrie při studiu protinádorové aktivity vybraných isochinolinových alkaloidů

Vlasáková, Štěpánka

Publikace:
Využití průtokové cytometrie při studiu protinádorové aktivity vybraných isochinolinových alkaloidů

Diplomová práceopen access

dc.contributor.advisor	Havelek, Radim
dc.contributor.author	Vlasáková, Štěpánka
dc.date.accepted	2017-06-06
dc.date.accessioned	2017-06-22T06:52:47Z
dc.date.available	2017-06-22T06:52:47Z
dc.date.issued	2017
dc.date.submitted	2017-05-12
dc.description.abstract	Diplomová práce se zabývá cytotoxickou a antiproliferační aktivitou vybraných isochinolinových alkaloidů chelidonin, homochelidonin, berbamin a bersavin. Práce v rámci svého cíle zjišťuje, jakým způsobem tyto vybrané alkaloidy ovlivňují viabilitu a proliferaci modelových buněčných linií, zda indukcí apoptózy nebo zástavou buněčného cyklu. V prvním kroku byla provedena základní analýza systémem xCELLigence, který zaznamenává změnu cell indexu buněk v čase, čímž se zjistila antiproliferační aktivita testovaných látek. Pro analýzu byly použity buněčné linie MRC-5, A2780 a A549. Chelidonin, homochelidonin, částečně bersavin a berbamin vykazovaly antiproliferační účinek. K verifikaci dat a pro rozšíření základního screeningu byla použita metoda stanovení viability a proliferace buněk pomocí Trypanové modři. Následně bylo využito metod průtokové cytometrie pro studium mechanismu antiproliferačního a cytotoxického působení. U vybraných alkaloidů byl studován vliv na změny distribuce buněčného cyklu u buněk MRC-5, A-2780, Jurkat a MOLT-4. Metodou kvantifikace vazby Annexinu V a propidium jodidu bylo zjišťováno procento buněk časně a pozdně apoptotických po expozici nejslibnějším testovaným látkám. Výsledky ukázaly účinnou antiproliferační aktivitu chelidoninu a homochelidoninu. Jejich schopnost zástavy buněčného cyklu v G1 nebo v G2/M fázi a schopnost indukce apoptózy. Bersavin rovněž jevil antiproliferační a cytotoxickou aktivitu doprovázenou zástavou buněčného cyklu v G1 nebo v G2/M fázi. Berbamin se jevil jako nejméně účinný alkaloid v porovnání s ostatními studovanými alkaloidy.	cze
dc.description.abstract-translated	This diplomma thesis deals with cytotoxic and antiproliferative activity of isochinoline alkaloids - chelidonine, homochelidonine, berbamine and bersavine. This thesis within its goal discovers in what ways these selected alkaloids influence viability and proliferation of model cell lines, if it is happening through the apoptosis induction or the cell cycle arrest. The first step was to perform the elementary analysis by the xCELLigence system which detects the cell index change in time and it lead to finding the antiproliferative activity of the tested substance. Cell lines MRC-5, A2780 and A549 were used for the analysis. Chelidonine, homochelidonine, partly bersavine and berbamine showed antiproliferative effect. The method of cell viability and proliferation determination using Trypan Blue was applied to verify data and to expanse elementary screening. Subsequently, we used the methods of flow cytometry to study the antiproliferative and cytotoxic mechanism. We explored the influence on distribution of cell cycle changes of MRC-5, A-2780, Jurkat and MOLT-4 cells in the selected alkaloids. The percentage of early and late apoptotic cells was determined by quantification of the Annexin V binding assay. The results showed effective chelidonine and homochelidonine antiproliferative activity and their capability of cell cycle arrest in G1 or G2/M phase and apoptosis induction. Bersavine also showed antiproliferative and cytotoxic activity accompanied by cell cycle arrest in G1 or G2/M phase. Berbamine appeared to be least effective alkaloid compared to other studied alkaloids.	eng
dc.description.defence	1. Prezentace výsledků diplomové práce. 2. Diskuze k posudku vedoucího a oponenta diplomové práce. 3. Studentka zodpověděla všechny dotazy a připomínky.	cze
dc.description.department	Fakulta chemicko-technologická	cze
dc.description.grade	Dokončená práce s úspěšnou obhajobou	cze
dc.format	95 s. (123 509 znaků)
dc.identifier	Univerzitní knihovna (studovna)
dc.identifier.signature	D35781
dc.identifier.stag	33114
dc.identifier.uri	https://hdl.handle.net/10195/68897
dc.language.iso	cze
dc.publisher	Univerzita Pardubice	cze
dc.rights	Bez omezení
dc.subject	Průtoková cytometrie	cze
dc.subject	isochinolinové alkaloidy	cze
dc.subject	chelidonin	cze
dc.subject	homochelidonin	cze
dc.subject	berbamin	cze
dc.subject	bersavin	cze
dc.subject	Flow cytometry	eng
dc.subject	isoquinoline alkaloids	eng
dc.subject	chelidonine	eng
dc.subject	homochelidonine	eng
dc.subject	berbamine	eng
dc.subject	bersavine	eng
dc.thesis.degree-discipline	Bioanalytik	cze
dc.thesis.degree-grantor	Univerzita Pardubice. Fakulta chemicko-technologická	cze
dc.thesis.degree-name	Mgr.
dc.thesis.degree-program	Speciální chemicko-biologické obory	cze
dc.title	Využití průtokové cytometrie při studiu protinádorové aktivity vybraných isochinolinových alkaloidů	cze
dc.title.alternative	Flow cytometry in the study of antitumor activity of selected isoquinoline alkaloids	eng
dc.type	diplomová práce	cze
dspace.entity.type	Publication