Optimalizace kultivačních podmínek hepatocytů v primární kultuře

Jakubíčková, Andrea

Publikace:
Optimalizace kultivačních podmínek hepatocytů v primární kultuře

Diplomová práceopen access

dc.contributor.advisor	Nováková Mužáková, Vladimíra
dc.contributor.author	Jakubíčková, Andrea
dc.contributor.referee	Lotková, Halka	cze
dc.date.accepted	2019-06-05
dc.date.accessioned	2019-06-18T08:50:54Z
dc.date.available	2019-06-18T08:50:54Z
dc.date.issued	2019
dc.date.submitted	2019-05-07
dc.description.abstract	Tato diplomová práce byla zaměřena na optimalizaci kultivačních podmínek hepatocytů v primární kultuře s ohledem na densitu buněk a dobu potřebnou pro přichycení buněk k povrchu mikrotitračních destiček (tzv. dobu seedingu). Primární kultury hepatocytů jsou používány pro toxikologické a farmakokinetické studie, pro studium metabolismu a genové exprese. Životaschopnost kultivovaných buněk a míra jejich poškození byla hodnocena pomocí aktivity buněčných dehydrogenáz (WST-1 test), aktivity laktátdehydrogenázy (LDH), resp. LDH-leakage, a aktivity kaspázy 3. Nejprve byla optimalizována densita buněk pro vybrané typy mikrotitračních destiček. Z výsledků vyplývá, že optimální density jsou 30 000 bb/j pro 96jamkové destičky, 200 000 bb/j pro 24jamkové destičky a 350 000 bb/j pro 12jamkové destičky. Tyto hodnoty odpovídají přibližně densitě 1,0×105 bb/cm2. Druhým úkolem bylo optimalizovat dobu potřebnou pro přichycení buněk k povrchu kultivačních destiček. Bylo zjištěno, že testované doby nemají vliv na hodnocené parametry hepatocytů.	cze
dc.description.abstract-translated	The thesis was focused on optimization of hepatocyte culture conditions in primary culture considering cell density and seeding time. Primary hepatocyte cultures are used for toxicological and pharmacokinetic studies, for the study of metabolism and gene expression. The viability of cultured cells and their damage rate was determined by cellular dehydrogenases activity (WST-1 test), lactate dehydrogenase activity (LDH), respectively LDH-leakage, and activity of caspase 3. At first, cell density for different well plate types was optimized. The results indicate that optimum densities are 30 000 cells/well for 96-well plates, 200 000 cells/well for 24-well plates and 350 000 cells/well for 12-well plates. These values correspond to a density 1,0×105 cells/cm2. Another aim of this work was to optimize the time of seeding. It was found that tested seeding times do not affect the evaluated parameters of hepatocytes.	eng
dc.description.defence	1. Prezentace výsledků diplomové práce. 2. Diskuze k posudku vedoucího a oponenta diplomové práce. 3. Studentka zodpověděla všechny dotazy a připomínky k DP.	cze
dc.description.department	Fakulta chemicko-technologická	cze
dc.description.grade	Dokončená práce s úspěšnou obhajobou	cze
dc.format	92 s.	cze
dc.identifier	Univerzitní knihovna (studovna)	cze
dc.identifier.signature	D39140
dc.identifier.stag	37643
dc.identifier.uri	https://hdl.handle.net/10195/73631
dc.language.iso	cze
dc.publisher	Univerzita Pardubice	cze
dc.rights	Bez omezení
dc.subject	hepatocyty	cze
dc.subject	primární kultura	cze
dc.subject	buněčná viabilita	cze
dc.subject	densita buněk	cze
dc.subject	doba seedingu	cze
dc.subject	hepatocytes	eng
dc.subject	primary culture	eng
dc.subject	cell viability	eng
dc.subject	cell density	eng
dc.subject	seeding time	eng
dc.thesis.degree-discipline	Bioanalytik	cze
dc.thesis.degree-grantor	Univerzita Pardubice. Fakulta chemicko-technologická	cze
dc.thesis.degree-name	Mgr.
dc.thesis.degree-program	Speciální chemicko-biologické obory	cze
dc.title	Optimalizace kultivačních podmínek hepatocytů v primární kultuře	cze
dc.title.alternative	Optimization of Culture Conditions of Hepatocyte in Primary Culture	eng
dc.type	diplomová práce	cze
dspace.entity.type	Publication