Zavedení separační metod pro průkaz Aβ peptidů, markerů Alzheimerovy choroby

Abstract

Pro separaci Aβ peptidů lišících se o několik aminokyselin bylo vyzkoušeno několik variant a modifikací elektroforetických metod. Jako nejvhodnější metoda pro separaci těchto peptidů byla vybrána Tricin/Tris SDS PAGE elektroforéza s 8 M ureou. Platnost metody byla ověřována na vzorcích reálných sér obohacených o syntetický Aβ peptid. Dále byla stanovena citlivost stanovení Aβ peptidu po vizualizaci gelu dusičnanem stříbrným. Separované Aβ peptidy na Tricin/Tris SDS PAGE elektroforéze s 8 M ureou byly prokázány a vizualizovány pomocí myších specifických protilátek proti N-terminálnímu konci 1 - 17 Aβ peptidu metodou imunoblottingu. Vizualizace touto metodou byla ověřena na vzorcích reálných sér obohacených o syntetický Aβ peptid.