Stanovení vybraných aminokyselin v plazmě pacientů s diabetes mellitus

Šanderová, Jana

Publikace:
Stanovení vybraných aminokyselin v plazmě pacientů s diabetes mellitus

Diplomová práceOmezený přístup

dc.contributor.advisor	Kanďár, Roman
dc.contributor.author	Šanderová, Jana
dc.contributor.referee	Kovařík, Jakub
dc.date.accepted	2013
dc.date.accessioned	2013-07-20T01:56:52Z
dc.date.available	2013-07-20T01:56:52Z
dc.date.issued	2013
dc.description.abstract	Tématem diplomové práce je stanovení vybraných aminokyselin v plazmě pacientů s diabetes mellitus. Byla popsána HPLC metoda s fluorescenční detekcí pro stanovení vybraných aminokyselin v lidské plazmě. Po odpovídající přípravě vzorku byly aminokyseliny derivatizovány s naftalen-2,3-dikarboxaldehydem za vzniku stabilního, vysoce fluoreskujícího derivátu. Pro separaci derivátů byla použita chromatografická kolona LiChroCart 250 x 4,0 mm Purospher Star RP-18e, 5 mikrom. Pro analýzu aminokyselin byla použita jako mobilní fáze A směs 25mmol/l NaH2PO4 a ethanolu (80:20, v/v), pH 7,2 ± 0,1, jako mobilní fáze B byl použit 100% ethanol. Analytické parametry metody u vybraných aminokyselin byly vyhovující. Linearita byla dosažena v celém rozsahu testovaných koncentrací. Přesnost v sérii vyjádřená variačním koeficientem byla pod 10 %. U pacientů s diabetes mellitus 2.typu byly v porovnání s kontrolní skupinou nalezeny statisticky významně vyšší hladiny aminokyselin s rozvětveným řetězcem. Vyvinuli jsme citlivou a dostatečně selektivní HPLC metodu s fluorescenční detekcí pro stanovení aminokyselin v lidské plazmě.	cze
dc.description.abstract-translated	The theme of the thesis is the determination of selected amino acids in plasma of patients with diabetes mellitus. A HPLC method with fluorescence detection for the measurement of selected amino acids in human plasma is described. After adequate sample preparation, the amino acids were derivatized with naphthalene-2,3-dicarboxaldehyde to form a stable, highly fluorescent derivative. For the separation, a reverse-phase column LiChroCart 250 x 4.0 mm, Purospher Star RP-18e, 5 mikrom, were used. For amino acids analysis, 25mmol/l sodium dihydrogenphosphate - ethanol (80:20, v/v), pH 7.2 ± 0.1 was used as a mobile phase A and 100% ethanol was used as a mobile phase B. The analytical parameters of this method were satisfactory for the determination of selected amino acids. The calibration curves were linear over the whole tested range. The intra-assay coefficients of variation were below 10%. In the patients with non-insulin dependent diabetes mellitus we found statistically significant higher levels of amino acids with branched chain compared to the control group. We developed a sensitive and selective high-performance liquid chromatography method with fluorescence detection for the determination selected amino acids in human plasma.	eng
dc.description.defence	1. Prezentace výsledků diplomové práce 2. Diskuze k posudkům vedoucího a oponenta diplomové práce 3. Diplomantka zodpověděla všechny dotazy a připomínky k DP	cze
dc.description.department	Katedra biologických a biochemických věd	cze
dc.description.grade	Dokončená práce s úspěšnou obhajobou	cze
dc.format	86 s.	cze
dc.format.extent	1846176 bytes	cze
dc.format.mimetype	application/pdf	cze
dc.identifier	Univerzitní knihovna (studovna)	cze
dc.identifier.signature	D27932	cze
dc.identifier.stag	20512	cze
dc.identifier.uri	https://hdl.handle.net/10195/52552
dc.language.iso	cze
dc.publisher	Univerzita Pardubice	cze
dc.rights	Práce bude přístupná pouze v rámci univerzity od 10.5.2014	cze
dc.subject	aminokyseliny	cze
dc.subject	naftalen-2	cze
dc.subject	3-dikarboxaldehyd	cze
dc.subject	HPLC	cze
dc.subject	fluorescenční detekce	cze
dc.subject	pacienti s diabetes mellitus	cze
dc.subject	amino acids	eng
dc.subject	naphthalene-2	eng
dc.subject	3-dicarboxaldehyde	eng
dc.subject	fluorescence detection	eng
dc.subject	patients with diabetes mellitus	eng
dc.thesis.degree-discipline	Analýza biologických materiálů	cze
dc.thesis.degree-grantor	Univerzita Pardubice. Fakulta chemicko-technologická	cze
dc.thesis.degree-name	Mgr.	cze
dc.thesis.degree-program	Speciální chemicko-biologické obory	cze
dc.title	Stanovení vybraných aminokyselin v plazmě pacientů s diabetes mellitus	cze
dc.title.alternative	Determination of selected amino acids in plasma of patients with diabetes mellitus	eng
dc.type	diplomová práce	cze
dspace.entity.type	Publication