Izolace a obohacovací techniky rekombinantních proteinů

Abstract

Diplomová práce se zabývá izolací a obohacovacími technikami rekombinantního proteinu. Globulin vázající pohlavní hormony obsahuje polyhistidinovou značku, která umožňuje izolaci separační metodou afinitní chromatografie na imobilizovaných Ni2+ iontech v kolonovém preparativním uspořádání. Pro dostatečnou čistotu produktu je nutné zařadit další purifikační krok. K těmto účelům bylo využito metod gelové permeační chromatografie a iontově výměnné chromatografie. V rámci těchto separačních metod byla optimalizována řada parametrů. K hodnocení účinnosti izolace byla použita metoda SDS-PAGE. Součástí práce byla také přesná identifikace SHBG pomocí hmotnostní spektrometrie (MS).