Metody stanovení nízkomolekulárních antioxidantů  a markerů oxidačního stresu v biologických vzorcích vzorcích

Sobotka, Jakub

Publikace:
Metody stanovení nízkomolekulárních antioxidantů a markerů oxidačního stresu v biologických vzorcích vzorcích

Diplomová práceOmezený přístup

dc.contributor.advisor	Pohanka, Miroslav	cze
dc.contributor.author	Sobotka, Jakub
dc.contributor.referee	Vlček, Vítězslav	cze
dc.date.accepted	2011	cze
dc.date.accessioned	2011-07-11T17:04:46Z
dc.date.available	2011-07-11T17:04:46Z
dc.date.issued	2011
dc.description.abstract	Diplomová práce byla zaměřena na stanovení nízkomolekulárních antioxidantů a markerů oxidačního stresu v biologických vzorcích. V teoretické části byla věnována pozornost oxidačnímu stresu jako takovému. Byly popsány různé cesty vniku reaktivních forem kyslíku a dusíku (RONS), jakožto hlavních původců poškození biomolekul. Proteiny, lipidy a DNA jsou modifikovány RONS, a tím dochází k rozvoji patologických procesů. V dalších kapitolách byla věnována pozornost antioxidačním obranným systémům (AOS), jako jsou antioxidační enzymy a nízkomolekulární antioxidanty. Pro experimentální část byl proveden výběr metod, s ohledem na dostupnost metody z hlediska vybavení a výpovědní hodnoty sledovaného parametru. Rovněž byla zkoumána toxikologie sirného yperitu (bojové označení HD), jeho mechanizmus účinku a vliv na oxidační stres. V experimentální části byly vybrané metody testovány na reálných vzorcích. Pro stanovení celkové antioxidační kapacity byla použita metoda FRAP, pro zkoumání produktů oxidačního stresu, přesněji sekundární produkt neenzymové oxidace lipidů malondyaldehyd (MDA), metoda TBARS a byla stanovena hladina hlavního intracelulárního antioxidantu glutationu (GSH). Stanovení antioxidačních enzymů, jako je glutathionreduktasa (GR) a glutation-S-transferasa (GST) bylo rovněž provedeno. Jako poslední marker byl zkoumán apoptotický enzym kaspasa 3. Byl proveden experiment s potkany kmene Wistar, kterým byl profylakticky podán antioxidant epigallokatechin gallát (EGCG) v různých dávkách a po 1 h byly vystaveni sirnému yperitu (HD). Popsanými metodikami byly zkoumány změny parametrů oxidačního stresu a antioxidační obrany organizmu. Získané výsledky byly diskutovány v závěru práce.	cze
dc.description.abstract-translated	This thesis was focused on determination of low molecular antioxidants and markers of oxidative stress in biological samples. In theoretical part of the thesis, was aimed our attention to oxidative stress itself. In the beginning of thesis, we described a few ways of reactive oxygen and nitrogen species (RONS) formation, which are potent to attack important biological molecules. Proteins, lipids and DNA are modified and pathology can appear consequently. The second view was focused on antioxidant defense systems, like antioxidant enzymes and low molecular antioxidants. We also have chosen the methods suitable for experimental part of the thesis, with the view on availability in light of accessories and scientific value of the tracked markers. Next intention was concentrated on sulphur mustards (HD), as an chemical warfare and his effect on oxidative stress. In an experimental part of this thesis, we have chosen methods tested on biological samples. The method FRAP was used for determination of total antioxidant capacity. TBARS method was chosen for assessment of lipids peroxidation represented by malondialdehyde (MDA). Another method determinates total glutathione (GSH) level. Next two methods served for determination of two major antioxidant enzymes, glutathione reductase (GR) and glutathione-S-transpherase (GST). Consequently, we estimated apoptosis by assay of enzyme, caspase 3. Wistar rats were used in the experiment. They were treated with an antioxidant epigallocatechin gallate (ECGC) prior to HD poisoning. Alteration in oxidative stress and antioxidant properties in the animal body were investigated using the chosen methods. Obtained results were discussed at the close of the thesis.	eng
dc.description.defence	1) Prezentace výsledků diplomové práce 2) Diskuze k posudkům vedoucího a oponenta diplomové práce 3) Diplomant zodpověděl všechny dotazy a připomínky k DP	cze
dc.description.department	Katedra biologických a biochemických věd	cze
dc.description.grade	Dokončená práce s úspěšnou obhajobou	cze
dc.format	64 s.	cze
dc.format.extent	1339344 bytes	cze
dc.format.mimetype	application/pdf	cze
dc.identifier	Univerzitní knihovna (sklad)	cze
dc.identifier.signature	D23681
dc.identifier.uri	https://hdl.handle.net/10195/38855
dc.language.iso	cze
dc.publisher	Univerzita Pardubice	cze
dc.rights	Práce není přístupná	cze
dc.subject	Oxidační stres	cze
dc.subject	Antioxidant	cze
dc.subject	Glutathion	cze
dc.subject	Yperit	cze
dc.subject	EGCG	cze
dc.subject	Oxidative stress	eng
dc.subject	Antioxidant	eng
dc.subject	Glutathione	eng
dc.subject	Sulfur Mustard	eng
dc.subject	EGCG	eng
dc.thesis.degree-discipline	Analýza biologických materiálů	cze
dc.thesis.degree-grantor	Univerzita Pardubice. Fakulta chemicko-technologická	cze
dc.thesis.degree-name	Mgr.	cze
dc.thesis.degree-program	Speciální chemicko-biologické obory	cze
dc.title	Metody stanovení nízkomolekulárních antioxidantů a markerů oxidačního stresu v biologických vzorcích vzorcích	cze
dc.title.alternative	Assay of low molecular weight antioxidants and markers of oxidative stress in biological samples	eng
dc.type	diplomová práce	cze
dspace.entity.type	Publication