Využití imobilizovaného lysozymu pro fragmentaci bakteriálních buněk pro MS analýzu

Pláteníková, Zuzana

Publikace:
Využití imobilizovaného lysozymu pro fragmentaci bakteriálních buněk pro MS analýzu

Diplomová práceOmezený přístup

dc.contributor.advisor	Korecká, Lucie
dc.contributor.author	Pláteníková, Zuzana
dc.contributor.referee	Řehulka, Pavel
dc.date.accepted	2013
dc.date.accessioned	2013-07-20T01:56:01Z
dc.date.available	2013-07-20T01:56:01Z
dc.date.issued	2013
dc.description.abstract	V rámci diplomové práce byla optimalizována metoda stanovení aktivity lysozymu v mikrotitrační destičce pomocí substrátu Micrococcus luteus, přípraven magnetický nosič s imobilizovaným lysozymem, stanovena operační a skladovací stabilita tohoto imobilizovaného lysozymu a připravený nosič byl využit pro fragmentaci bakteriálních buněk pro jejich snazší identifikaci pomocí hmotnostní spektrometrie. K přípravě magnetického nosiče byly vybrány částice s hydroxylovými a karboxylovými funkčními skupinami. Pro fragmentaci buněk byly využity částice s hydroxylovými funkčními skupinami. U těchto částic byla také stanovena operační a skladovací stabilita imobilizovaného lysozymu s pomocí fluorescenčního substrátu 4-methylumbelliferyl-β-D-N,N',N''-triacetylchitotriosidu. Vedle lysozymu byl k fragmentaci buněčné stěny využíván také roztok acetonitrilu s kyselinou trifluoroctovou. Výsledky fragmentace byly ověřovány elektroforeticky a pomocí MALDI – TOF MS.	cze
dc.description.abstract-translated	Within this thesis the method for the determination of lysozyme activity in a microtiter plate with the substrate Micrococcus luteus has been optimized, magnetic carriers with immobilized lysozyme were prepared, operational and storage stability of the immobilized lysozyme were determined and subsequently prepared carrier was used for the fragmentation of bacterial cells for their easier identification by mass spectrometry. Particles with the hydroxyl and carboxyl functional groups were selected for preparation of the magnetic carrier with immobilized lysozyme. Particles with hydroxyl functional groups were used for the fragmentation of cells. The operational and storage stability of the immobilized lysozyme for these particles was determined by using the fluorescent substrate 4-methylumbelliferyl-β-DN,N',N''-triacetylchitotriosid. Acetonitrile solution with trifluoroacetic acid was, in addition to the lysozyme, also used for fragmentation of the cellular walls. Efficiency of fragmentation was verified by electrophoresis and MALDI – TOF MS.	eng
dc.description.defence	1. Prezentace výsledků diplomové práce 2. Diskuze k posudkům vedoucího a oponenta diplomové práce 3. Diplomantka zodpověděla všechny dotazy a připomínky k DP	cze
dc.description.department	Katedra biologických a biochemických věd	cze
dc.description.grade	Dokončená práce s úspěšnou obhajobou	cze
dc.format	96 s.	cze
dc.format.extent	4695362 bytes	cze
dc.format.mimetype	application/pdf	cze
dc.identifier	Univerzitní knihovna (studovna)	cze
dc.identifier.signature	D27927	cze
dc.identifier.stag	20501	cze
dc.identifier.uri	https://hdl.handle.net/10195/52408
dc.language.iso	cze
dc.publisher	Univerzita Pardubice	cze
dc.rights	Pouze v rámci univerzity	cze
dc.subject	lysozym	cze
dc.subject	imobilizace	cze
dc.subject	magnetické nosiče	cze
dc.subject	buněčná stěna bakterií	cze
dc.subject	ACN/TFA	cze
dc.subject	MALDI - TOF MS	cze
dc.subject	lysozyme	eng
dc.subject	immobilization	eng
dc.subject	magnetic carriers	eng
dc.subject	cell wall of bacteria	eng
dc.thesis.degree-discipline	Analýza biologických materiálů	cze
dc.thesis.degree-grantor	Univerzita Pardubice. Fakulta chemicko-technologická	cze
dc.thesis.degree-name	Mgr.	cze
dc.thesis.degree-program	Speciální chemicko-biologické obory	cze
dc.title	Využití imobilizovaného lysozymu pro fragmentaci bakteriálních buněk pro MS analýzu	cze
dc.title.alternative	Utilization of immobilized lysozyme for fragmentation of bacterial cells for MS analysis	eng
dc.type	diplomová práce	cze
dspace.entity.type	Publication