Purifikace askorbátoxidázy izolované z cukety (Cucurbita pepo medullosa)

Abstract

Teoretická část diplomové práce popisuje přírodní zdroje enzymu askorbátoxidázy, způsoby extrakce, selektivní precipitace proteinů a různé způsoby chromatografických purifikací. Praktická část této práce je zaměřená na ověření a optimalizaci jednotlivých kroků přípravy enzymu. Jako zdroj enzymu byla použita cuketa Cucurbita pepo medullosa. K chromatografickému čištění proteinu byl použit CM Sephadex C50 s gradientovou elucí. Výsledkem diplomové práce je ucelený postup laboratorní přípravy enzymu askorbátoxidázy od extrakce proteinu z přírodního materiálu, selektivní precipitace proteinů, selektivní membránové separace (ultrafiltrace), nízkotlaké kapalinové chromatografie až po lyofilizaci.