Využití biosenzorů pro detekci inhibitorů cholinesteráz

Abstract

Tato diplomová práce se zabývala testováním inhibitorů cholinesteras pomocí biosensorů. Michaelisova konstanta, mezná rychlost a IC50 byly stanoveny spektrofotometrickou Ellmanovo metodou a elektrochemickou metodou (square-wave voltametrie). Získali jsme rozdílné výsledky v důsledku odlišných reakčních podmínek a jiné detekce. Dále jsme hledali sensor, který bude poskytovat nejlepší odezvu po imobilizaci enzymu metodou adsorpce a zesíťování glutaraldehydem. Následně byl pro testování inhibitorů acetylcholinesterasy vybrán nejlepší sensor, který se vyznačoval stabilními výsledky a odezvou, která neklesala v závislosti na čase. Tyto vlastnosti měl Pt-AgPd/Pt sensor. Naopak sensory s uhlíkovou měrnou elektrodou byly nevhodné, protoţe se na ně nepodařilo imobilizovat enzym. Po analýze jednotlivých inhibitorů acetylcholinesterasy byla stanovena jejich inhibiční účinnost a typ inhibice. Jako inhibitor s nejvyšší inhibiční účinností byl identifikován inhibitor 4. Klíčová slova: