Charakterizace nukleární kondenzace a  fragmentace u modelového poškození buněk

Kynclová, Karolína

Publikace:
Charakterizace nukleární kondenzace a fragmentace u modelového poškození buněk

Diplomová práceopen access

dc.contributor.advisor	Nývltová, Pavlína
dc.contributor.author	Kynclová, Karolína
dc.date.accepted	2023-06-07
dc.date.accessioned	2023-08-15T08:01:57Z
dc.date.available	2023-08-15T08:01:57Z
dc.date.issued	2023
dc.date.submitted	2023-05-05
dc.description.abstract	Diplomová práce se zabývá detekcí nukleárních změn, které se objevují v průběhu apoptotického procesu. Teoretická část se věnuje popisu mechanismu apoptotické buněčné smrti s důrazem na jaderné změny, dále jsou zde popsány fluorescenční metody a fluorescenční sondy používané k detekci těchto jaderných změn. V závěru se teoretická část zabývá suspenzními buněčnými liniemi. Experimentální část je zaměřena na detekci nukleární kondenzace a fragmentace pomocí kvantitativní spektrofluorimetrické metody Hoechst 33258 a především na její optimalizaci pro suspenzní buňky. Pro optimalizaci jsme zvolili buněčnou linii Jurkat, kterou jsme inkubovali s induktory apoptózy - cisplatinou, kamptotecinem a staurosporinem. Ke zhodnocení cytotoxicity vybraných toxinů jsme nejprve použili testy pro stanovení aktivity mitochondriálních dehydrogenáz a intracelulární hladiny glutathionu. Následně jsme detekovali nukleární kondenzaci a fragmentaci metodou Hoechst 33258 a provedli optimalizaci parametrů měření pro suspenzní buňky. Výsledky jsou shrnuty a diskutovány v závěru práce.	cze
dc.description.abstract-translated	The diploma thesis deals with the detection of nuclear changes that appear during the apoptotic process. The theoretical part is dedicated to description of the mechanism of apoptotic cell death with an emphasis on nuclear changes, and the fluorescence methods and fluorescent probes used to detect these nuclear changes are also described. Finally, the theoretical part deals with suspension cell lines. The experimental part is focused on the detection of nuclear condensation and fragmentation using the quantitative spectrofluorimetric method Hoechst 33258 and especially on its optimization for suspension cells. For optimization, we chose the Jurkat cell line, which we incubated with apoptosis inducers - cisplatin, camptothecin and staurosporine. To evaluate the cytotoxicity of selected toxins, we first used tests to determine the activity of mitochondrial dehydrogenases and the intracellular level of glutathione. Subsequently, we detected nuclear condensation and fragmentation using the Hoechst 33258 method and optimized the measurement parameters for suspension cells. The results are summarized and discussed at the end of the thesis.	eng
dc.description.defence	1. Prezentace výsledků diplomové práce. 2. Diskuze k posudkům vedoucího a oponenta diplomové práce. 3. Student/ka zodpověděl/la všechny dotazy a připomínky k DP.	cze
dc.description.department	Fakulta chemicko-technologická	cze
dc.description.grade	Dokončená práce s úspěšnou obhajobou	cze
dc.identifier.stag	45936
dc.identifier.uri	https://hdl.handle.net/10195/81900
dc.language.iso	cze
dc.publisher	Univerzita Pardubice	cze
dc.rights	Bez omezení
dc.subject	apoptóza	cze
dc.subject	fluorescenční metody	cze
dc.subject	detekce nukleární kondenzace a fragmentace	cze
dc.subject	Hoechst 33258	cze
dc.subject	suspenzní buněčné linie.	cze
dc.subject	apoptosis	eng
dc.subject	fluorescent methods	eng
dc.subject	detection of nuclear condensation and fragmentation	eng
dc.subject	Hoechst 33258	eng
dc.subject	suspension cell lines	eng
dc.thesis.degree-discipline	Bioanalytická laboratorní diagnostika ve zdravotnictví	cze
dc.thesis.degree-grantor	Univerzita Pardubice. Fakulta chemicko-technologická	cze
dc.thesis.degree-name	Mgr.
dc.thesis.degree-program	Bioanalytická laboratorní diagnostika ve zdravotnictví	cze
dc.title	Charakterizace nukleární kondenzace a fragmentace u modelového poškození buněk	cze
dc.title.alternative	Characterization of Nuclear Condensation and Fragmentation in Model Cell Damage	eng
dc.type	diplomová práce	cze
dspace.entity.type	Publication