Využití elektrochemického imunosensoru pro průkaz proteinů

Abstract

Diplomová práce byla zaměřena na přípravu elektrochemického imunosensoru, který bude využit pro identifikaci specifických proteinů v biologickém vzorku. Výhodou je vysoká specifita imunochemického systému v kombinaci s jednoduchostí a citlivostí elektrochemických převodníků. Pro konstrukci imunosensoru bylo využito tištěných sensorů malých rozměrů, které umožňují analýzu v malých objemech vzorků, a magnetických částic s imobilizovanou specifickou protilátkou. Byly zvoleny vhodné magnetické částice a optimalizovány podmínky imobilizace protilátek. Jako modelový systém byl zvolen: králičí protilátky proti ovalbuminu - ovalbumin. Při stanovení proteinu je využito sendvičového uspořádání ELISA metody. Vzniklý imunokomplex je detekován pomocí sekundárních protilátek značených enzymem křenovou peroxidasou (HRP), úbytek peroxidu vodíku jako substrátu je elektrochemicky detekován. Pro elektrochemickou analýzu byl vytypován vhodný elektrodový systém, vhodná metoda detekce, byly optimalizovány podmínky analýzy. Pro porovnání získaných výsledků a ověření specifity zvoleného modelového systému byla použita klasická ELISA metoda, využívající chromogenního substrátu se spektrofotometrickou koncovkou.