Metody detekce funkce mitochondrií

Abstract

Cílem této bakalářské práce je popis mitochondriálních funkcí a vhodných metod pro jejich detekci. První část bakalářské práce se zabývá původem těchto organel, stavbou jejich membrán a proteiny, které se na membránách vyskytují. Tyto proteiny mají význam v mitochondriální dynamice, jejímž prostřednictvím je udržována buněčná homeostáza. Práce obsahuje přehled mitochondriálních funkcí, jejich význam včetně detailnějšího popisu těch nejdůležitějších. Druhá část práce je soustředěna na hodnocení mitochondriálních funkcí, především s využitím fluorescenčních indikátorů. V práci jsou popsány metody pro detekci membránového potenciálu mitochondrií pomocí nejběžnějších fluorescenčních sond. Další z ukazatelů správné funkce mitochondrií je hladina reaktivních forem kyslíku, způsobující oxidační stres, který má mimo jiné vliv na buněčné stárnutí. V tomto případě jsou porovnávány kromě sond se schopností fluorescence, také chemiluminescenční sondy a cílové proteiny. Část práce je také zaměřena na princip metod, jako jsou konfokální mikroskopie a vysokoúčinná respirometrie.