HPLC/ED stanovení kyseliny lipoové v lidské plazmě

Pyskatý, Ladislav

Publikace:
HPLC/ED stanovení kyseliny lipoové v lidské plazmě

Diplomová práceopen access

dc.contributor.advisor	Žáková, Pavla
dc.contributor.author	Pyskatý, Ladislav
dc.date.accepted	2009
dc.date.accessioned	2009-07-03T14:16:17Z
dc.date.available	2009-07-03T14:16:17Z
dc.date.issued	2009
dc.description.abstract	Kyselina lipoová je přírodně se vyskytující sloučenina, přítomna jako kofaktor v několika mitochondriálních enzymech, které jsou zahrnuty v metabolismu a energetické produkci. Jedná se o 8-uhlíkovou sloučeninu, obsahující dva atomy síry v dithiolanovém kruhu a skládající se ze dvou enantiomerů. Ve své volné formě je kyselina lipoová, především její redukovaná forma, kyselina dihydrolipoová, silným antioxidantem, fungujícím jako "odklizeč" reaktivních forem kyslíku. Dnes je studována zejména pro tyto antioxidační vlastnosti. Pro její analýzu je dostupných mnoho metod. Většina z nich však nejsou vyhovující kvůli jejich nespecifitě, nedostatku citlivosti, dlouhotrvající přípravě vzorku a potřeby drahého analytického vybavení. Z tohoto důvodu jsme se pokusili vyvinout jednoduchou a účinnou metodu pro její stanovení v lidské plazmě použitím HPLC s elektrochemickou detekcí na principu coulometrie. Mobilní fáze byla složená ze směsi 20 mmol/l NaH2PO4/acetonitril/metanol (70:25:5 v/v) a její průtok byl 1 ml/min. Potenciály analytické cely byly nastaveny na 450 mV a 750 mV. Analytické parametry metody jsou dostačující s detekčním limitem11,5 nmol/l. Naše metoda může být použita pro stanovení jak endogenních koncentrací kyseliny lipoové, tak i pro suplementační studie.	cze
dc.description.abstract-translated	Lipoic acid is a natural compound present as a cofactor in several mitochondrial enzymes that are involved in metabolism and energy production. It is an eight-carbon compound containing two sulphur atoms in a dithiolane ring structure and consists of two enantiomers. In its free form, lipoic acid, especially its reduced form, dihydrolipoic acid, is a powerful antioxidant, functioning as a reactive oxygen species scavenger. At present, the lipoic acid is studied primarily for its antioxidant properties. Many methods are currently available for the analysis of lipoic acid. Most of these methods are not satisfactory due to thein non-specificity, lack of sensitivity, long-term sample preparation and need for expensive analytical equipment. This is the reason for our tendery to develop simple and effective method for its determination in human plasma by using HPLC with electrochemical detection on the principle of coulometry. The mobile phase consisted of a mixture 20 mmol/l NaH2PO4/acetonitril/methanol (70:25:5 v/v) and the flow rate was 1 ml/min. Potentials of analytical cell were set to 450 mV and 750 mV. Analytical performance of this method is satisfactory with the detection limit 11.5 nmol/l. Our method can be applied for both the determination of lipoic acid in endogenous levels and for supplementation study.	eng
dc.description.department	Katedra biologických a biochemických věd	cze
dc.description.grade	Dokončená práce s úspěšnou obhajobou	cze
dc.format	62 s.	cze
dc.format.extent	899365 bytes
dc.format.mimetype	application/pdf
dc.identifier	Univerzitní knihovna (sklad)	cze
dc.identifier.signature	D20339
dc.identifier.uri	https://hdl.handle.net/10195/34427
dc.language.iso	cze
dc.publisher	Univerzita Pardubice	cze
dc.rights	Bez omezení	cze
dc.subject	lipoic acid	eng
dc.subject	dihydrolipoic acid	eng
dc.subject	antioxidant properties	eng
dc.subject	electrochemical detection	eng
dc.subject	kyselina lipoová	cze
dc.subject	kyselina dihydrolipoová	cze
dc.subject	antioxidační vlastnosti	cze
dc.subject	HPLC	cze
dc.subject	elektrochemická detekce	cze
dc.thesis.degree-discipline	Analýza biologických materiálů	cze
dc.thesis.degree-grantor	Univerzita Pardubice. Fakulta chemicko-technologická	cze
dc.thesis.degree-name	Mgr.	cze
dc.thesis.degree-program	Speciální chemicko-biologické obory	cze
dc.title	HPLC/ED stanovení kyseliny lipoové v lidské plazmě	cze
dc.title.alternative	HPLC/ED determination of lipoic acid in human plasma	eng
dc.type	diplomová práce	cze
dspace.entity.type	Publication