Studium neurotoxicity těžkých kovů in vitro

Abstract

Tato diplomová práce je zaměřena na studium neurotoxicity těžkých kovů in vitro pomocí moderních bioanalytických metod. Pro sledování neurotoxicity CdCl2 a HgCl2 byla použita buněčná linie lidského neuroblastomu SH-SY5Y. V teoretické části práce jsou shrnuty mechanismy působení kadmia a rtuti na nervové buňky, informace o hlavním intracelulárním antioxidantu glutathionu a dále jsou také popsány bioanalytické metody, které lze využít pro sledování neurotoxického účinku těžkých kovů. Zvláštní pozornost je věnována stanovení buněčné viability, míry oxidačního stresu a apoptózy. Experimentální část je zaměřena na testování vlivu CdCl2 a HgCl2 na koncentraci intracelulárního glutathionu a na dehydrogenázovou aktivitu buněk SH-SY5Y. Dále jsou s využitím pokročilých mikroskopických technik detekovány změny buněčné morfologie v reálném čase. Pomocí mikroskopie ve fázovém kontrastu a fluorescenčních sond jsou navíc vizualizována buněčná jádra a cytoskelet. V poslední části diplomové práce jsou shrnuty naměřené výsledky, které jsou následně diskutovány.