Hodnocení aktivity peritoneálních makrofágů

Moravcová, Alena

Publikace:
Hodnocení aktivity peritoneálních makrofágů

Diplomová práceopen access

dc.contributor.advisor	Lotková, Halka	cze
dc.contributor.author	Moravcová, Alena
dc.contributor.referee	Kučera, Otto	cze
dc.date.accepted	2011	cze
dc.date.accessioned	2011-07-11T22:19:05Z
dc.date.available	2011-07-11T22:19:05Z
dc.date.issued	2011
dc.description.abstract	Tato diplomová práce se zabývá stanovením tří cytokinů produkovaných peritoneálními makrofágy potkana - TNF?, IL-1? a IL-6 ve vztahu k rozdílnému přístupu operačního výkonu - laparotomickému či laparoskopickému. Byla měřena bazální produkce uvedených cytokinů a jejich produkce po stimulaci makrofágů bakteriálním lipopolysacharidem (LPS). Izolace buněk z peritonea probíhala ve dvou intervalech - 24 nebo 72 hodin po operaci. Vlastní analýze předcházela vždy 24 hodinová kultivace s, resp. bez LPS. Optimální koncentrace LPS vhodné pro stimulaci peritoneálních makrofágů bylo nutno experimentálně docílit. Zjištěná optimální koncentrace LPS byla 0,1 ?g/ml. Hladina cytokinů byla stanovena pomocí sendvičové ELISA metody. V teoretické části je popsána organizace imunitního systému a funkce jeho jednotlivých složek v imunitní odpovědi s důrazem na úlohu makrofágů. Významná část je věnována roli cytokinů v modulaci imunitní odpovědi. Dále je podána literární rešerše o dějích v peritoneální oblasti ve vztahu k laparotomickému či laparoskopickému zásahu do abdominální krajiny a zhodnocení systémové a lokální imunitní odpovědi, která tyto chirurgické zákroky doprovází. Experimentální část je věnována popisu principu EIA metod se zaměřením na ELISA metody a její variace. Dále je v této části uveden optimalizovaný postup izolace a kultivace peritoneálních makrofágů a vlastního stanovení jimi produkovaných cytokinů metodou ELISA. Výsledková část obsahuje postup optimalizace koncentrace LPS vhodného pro stimulaci peritoneálních makrofágů. Dále zahrnuje grafickou a slovní dokumentaci bazální i stimulované produkce jednotlivých cytokinů makrofágy izolovanými 24, resp. 72 hodin po zákroku. Bazální produkce cytokinů byla signifikantně vyšší u laparoskopované skupiny, nejvyšší produkci cytokinů stimulovanými makrofágy vykazovala naopak skupina po laparotomii. Zhodnocení získaných výsledků je rozebíráno v diskusi.	cze
dc.description.abstract-translated	This thesis deals with the determination of the three cytokines produced by rat peritoneal macrophages - TNF?, IL-1? and IL-6 in relation to the different approach of surgery - laparoscopic or laparotomic. Was measured basal production of cytokines and those of their production after stimulation of macrophages by bacterial lipopolysaccharide (LPS). Isolation of peritoneal cells was performed in two intervals - 24 or 72 hours after surgery. The actual analysis is always preceded by 24 hours of cultivation with, respectively without LPS. The optimal concentration of LPS suitable for stimulation of peritoneal macrophages was necessary to achieve experimentally. The observed optimal concentration of LPS was 0,1 ?g/ml. The level of cytokines was determined using a sandwich ELISA method. The theoretical part describes the organization of the immune system and functions of its individual components in the immune response with emphasis on the role of macrophages. A significant part is devoted to the role of cytokines in the modulation of immune responses. In addition, is given a literature review about actions in the peritoneal area in relation to laparotomic or laparoscopic intervention into the abdominal landscape and assess systemic and local immune response that accompanies the surgery. The experimental section is devoted to describing the principle of EIA methods, focusing on the ELISA method and its variations. Additionally, the optimized process isolation and cultivation of peritoneal macrophages and optimized determination of cytokines measured by ELISA is described there. Results contain the process of optimization of an appropriate concentration of LPS suitable for stimulation of peritoneal macrophages. It also includes a graphical and verbal documentation of basal and stimulated production of cytokines by macrophages isolated 24, resp. 72 hours after surgery. Basal cytokine production was significantly higher in laparoscopic group, the highest cytokine production by stimulated macrophages showed a group after laparotomy. Evaluation of obtained results is discussed in the discussion.	eng
dc.description.defence	1) Prezentace výsledků diplomové práce 2) Diskuze k posudkům vedoucího a oponenta diplomové práce 3) Diplomantka zodpověděla všechny dotazy a připomínky k DP	cze
dc.description.department	Katedra biologických a biochemických věd	cze
dc.description.grade	Dokončená práce s úspěšnou obhajobou	cze
dc.format	104 s.	cze
dc.format.extent	2308952 bytes	cze
dc.format.mimetype	application/pdf	cze
dc.identifier	Univerzitní knihovna (sklad)	cze
dc.identifier.signature	D23684
dc.identifier.uri	https://hdl.handle.net/10195/39633
dc.language.iso	cze
dc.publisher	Univerzita Pardubice	cze
dc.rights	bez omezení	cze
dc.subject	peritoneální makrofágy	cze
dc.subject	cytokiny	cze
dc.subject	ELISA	cze
dc.subject	LPS	cze
dc.subject	peritoneal macrophages	eng
dc.subject	cytokines	eng
dc.subject	ELISA	eng
dc.subject	LPS	eng
dc.thesis.degree-discipline	Analýza biologických materiálů	cze
dc.thesis.degree-grantor	Univerzita Pardubice. Fakulta chemicko-technologická	cze
dc.thesis.degree-name	Mgr.	cze
dc.thesis.degree-program	Speciální chemicko-biologické obory	cze
dc.title	Hodnocení aktivity peritoneálních makrofágů	cze
dc.title.alternative	Evaluation of peritoneal macrophage activity	eng
dc.type	diplomová práce	cze
dspace.entity.type	Publication