Vývoj a optimalizace podmínek vazby sfingolipid ceramid N-deacylázy na magnetické mikročástice

Černá, Veronika

Publikace:
Vývoj a optimalizace podmínek vazby sfingolipid ceramid N-deacylázy na magnetické mikročástice

Diplomová práceOmezený přístup

dc.contributor.advisor	Bílková, Zuzana	cze
dc.contributor.author	Černá, Veronika
dc.date.accepted	2010	cze
dc.date.accessioned	2010-07-03T16:37:27Z
dc.date.available	2010-07-03T16:37:27Z
dc.date.issued	2010
dc.description.abstract	Předložená diplomová práce byla zaměřena na vývoj a optimalizaci magnetického nosiče s imobilizovanou Sfingolipid ceramid N-deacylázou. Pro katalýzu byl vybrán vhodný porézní magnetický nosič s hydroxylovou funkční skupinou. U připraveného nosiče jsme jeho enzymovou aktivitu charakterizovaly pomocí specifických substrátů Gg4Cer (gangliotetraosyl ceramid), který byl použit pro hydrolytickou reakci a lyso-Gb3Cer (lyso-ceramid trihexosid), který byl použit pro syntetickou reakci. U tohoto nosiče byla také testována operační a skladovací stabilita. Další část diplomové práce byla zaměřena na porovnávání enzymové aktivity solubilní a imobilizované formy Sfingolipid ceramid N-deacylázy v závislosti na teplotě a složení reakčního média. Byly tak určeny vhodné podmínky pro reakci katalyzovanou Sfingolipid ceramid N-deacylázou. Dále naměřené hodnoty byly použity ke stanovení KM pro substrát Gg4Cer (lyso-Gb3Cer). Vzorky byly analyzovány metodou chromatografie na tenké vrstvě s denzitometrickým vyhodnocením a též hmotností spektrometrií.	cze
dc.description.abstract-translated	Presented diploma thesis was focused on development and optimization of Sphingolipid ceramide N-deacylase in magnetic carries. Porous magnetic particle with hydroxyl function group was chosen. We were characterized enzymatic aktivity of carrier by the specific substrate, Gg4Cer (gangliotetraosyl ceramide) for hydrolytic reaction and lyso-Gb3Cer (lyso-ceramide trihexoside) for reverse reaction. The storage and operational stability was also determined at this carrier. Next part of diploma thesis was focused on matching enzymatic activity soluble and immobilized Sphingolipid ceramide N-deacylase depending on temperature and composition of reaction medium. Acceptable conditions for activity of Sphingolipid ceramide N-deacylase were defined. Furthermore we tried to determine value of KM for substrate Gg4Cer and lyso-Gb3Cer. Samples were analyzed by technique thin layer chromatography with densitometric evaluation and by mass spectrometry.	eng
dc.description.defence	1) Prezentace výsledků DP 2) Diskuze k posudkům vedoucího a oponenta DP 3) Diplomantka zodpověděla všechny dotazy a připomínky k DP	cze
dc.description.department	Katedra biologických a biochemických věd	cze
dc.description.grade	Dokončená práce s úspěšnou obhajobou	cze
dc.format	81 s.	cze
dc.format.extent	1003410 bytes	cze
dc.format.mimetype	application/pdf	cze
dc.identifier	Univerzitní knihovna (sklad)	cze
dc.identifier.signature	D21800	cze
dc.identifier.signature	D21800
dc.identifier.uri	https://hdl.handle.net/10195/36929
dc.language.iso	cze
dc.publisher	Univerzita Pardubice	cze
dc.rights	Práce není přístupná	cze
dc.subject	sfingolipidy	cze
dc.subject	magnetický nosič	cze
dc.subject	kovalentní vazba	cze
dc.subject	sphingolipids	eng
dc.subject	Sphingolipid ceramide N-deacylase	eng
dc.subject	magnetic carrier	eng
dc.subject	covalent bound	eng
dc.thesis.degree-discipline	Analýza biologických materiálů	cze
dc.thesis.degree-grantor	Univerzita Pardubice. Fakulta chemicko-technologická	cze
dc.thesis.degree-name	Mgr.	cze
dc.thesis.degree-program	Speciální chemicko-biologické obory	cze
dc.title	Vývoj a optimalizace podmínek vazby sfingolipid ceramid N-deacylázy na magnetické mikročástice	cze
dc.title.alternative	Development and optimization of sphingolipid ceramide N-deacylase immobilization to magnetic microparticles	eng
dc.type	diplomová práce	cze
dspace.entity.type	Publication