Využitie kombinácie gélovej permeačnej chromatografie s rozptylovým fotometrom pre charakterizáciu molekulárnej štruktúry a štúdium vlastností kyseliny hyalurénovej

Abstract

Cieľom tejto dezertačnej práce bolo pripraviť vzorky hyaluronanu s rozličnou mólovou hmotnosťou, experimentálne zistiť navhodnejšie podmienky pre GPC-MALS analýzu kyseliny hyalurónovej a porovnať túto metódu s ostatnými často používanými metódami stanovenia mólovej hmotnosti. Ďalším čiastkovým cieľom bolo objasnenie molekulárnej štruktúry tohto zaujímavého biopolyméru. V úvode sa práca zaoberá teóriou stanovenia mólovej hmotnosti, vysvetlením separačného mechanizmu a inštrumentácie. Ďalej sú predstavené alternatívne metódy stanovenia mólovej hmotnosti a molekulárnej distribúcie hyaluronanu. Experimentálna časť zahŕňa zoznam použitých chemikálií a spotrebného materiálu, spôsoby prípravy vzoriek a medodológiu používanú pre meranie. Posledná časť práce je rozdelená do niekoľkých kapitol, ktoré sa zaoberajú prípravou hyaluronanu s rozličnou mólovou hmotnosťou, optimalizáciou separačných podmienok GPC-MALS analýzy a porovnaním metódy s ostatnými často používanými technikami stanovenia mólovej hmotnosti, a to s frakcionáciou tokom v poli a analytickou ultracentrifugáciou. Posledná časť je venovaná štúdiu roztokových vlastností hyaluronanu v širokom rozsahu mólových hmotností pomocou viskozimetrie s použitím klasického kapilárneho Ubbelohdeho viskozimetru a kombinácie gélovej permeačnej chromatografie s viac uhlovým detektorom rozptylu svetla a on-line viskozimetrom.