HPLC/MS stanovení dimethylovaných argininů v lidské plazmě

Abstract

Tato diplomová práce se věnuje vývoji a optimalizaci analytické metody pro stanovení dimethylovaných forem L-argininu, konkrétně symetrického a asymetrického dimethylargininu, v lidské plazmě. K separaci těchto strukturních izomerů byla využita kapalinová chromatografie v režimu HILIC pomocí gradientové eluce. Detekce analytů byla zajištěna pomocí tandemové hmotnostní spektrometrie s využitím specifických produktových iontů pro každý z izomerů. Klíčová část práce byla zaměřena na nalezení optimálních podmínek gradientu pro dosažení dostatečného rozlišení analytů. Součástí výzkumu byl také návrh extrakčního postupu a zavedení izotopově značených vnitřních standardů. Vyvinutý postup byl následně testován z hlediska linearity, mezí detekce a kvantifikace, preciznosti a výtěžnosti, přičemž byl posouzen také vliv biologické matrice na analýzu.