dc.contributor.advisor |
Ventura, Karel |
|
dc.contributor.author |
Pilařová, Michaela
|
|
dc.date.accessioned |
2009-07-03T14:18:52Z |
|
dc.date.available |
2009-07-03T14:18:52Z |
|
dc.date.issued |
2009 |
|
dc.identifier |
Univerzitní knihovna (sklad) |
cze |
dc.identifier.uri |
http://hdl.handle.net/10195/34436 |
|
dc.description.abstract |
Cílem této diplomové práce bylo nalézt vhodnou metodu pro stanovení kokainu a jeho metabolitu benzoylekgoninu v lidském séru a moči. Teoretická část diplomové práce obsahuje základní informace o drogách se zaměřením na kokain. Dále pojednává o nejběžněji užívaných metodách pro stanovení drog z biologického materiálu. V experimentální části se zabýváme stanovením kokainu a benzoylekgoninu v lidském séru a moči. Na úpravu vzorků séra a moče před vlastním stanovením kokainu a benzoylekgoninu jsme použili extrakci kapalina-kapalina a extrakci pevnou fází. Jako extrakční činidla v systému kapalina-kapalina jsme použili dichlormethan:2-propanol, chloroform: 2-propanol a chloroform:ethanol. Pro extrakci pevnou fází jsme testovali kolonky Bond Elut LRC-Certify a LiChrolut TSC a dvě eluční činidla - dichlormethan: 2-propanol:hydroxid amonný a methanol-hydroxid amonný. Pro separaci kokainu a benzoylekgoninu jsme použili GC-MS (kvadrupól, elektronová ionizace). Jako vnitřní standard jsme použili kokain-D3. Pro plynovou chromatografii bylo nutné provést derivatizaci. Jako derivatizační činidla jsme testovali BSTFA s 1 % TMCS a MSTFA s jodidem amonným a ethanthiolem. Porovnáním výsledků jednotlivých metod přípravy vzorků a derivatizace jsme jako nejvhodnější metodu pro stanovení kokainu a benzoylekgoninu vybrali extrakci na kolonkách Bond Elut LRC-Certify za eluce methanol:hydroxid amonný a derivatizace s BSTFA s 1 % TMCS při teplotě 70 °C po dobu 30 minut. Pro vybranou metodu jsme následně sestavili kalibraci a analyzovali reálné a kontrolní vzorky. |
cze |
dc.format |
80 s. |
cze |
dc.language.iso |
cze |
|
dc.publisher |
Univerzita Pardubice |
cze |
dc.subject |
Drugs |
eng |
dc.subject |
cocaine |
eng |
dc.subject |
benzoylecgonine |
eng |
dc.subject |
solid phase extraction |
eng |
dc.subject |
gas chromatography |
eng |
dc.subject |
Drogy |
cze |
dc.subject |
kokain |
cze |
dc.subject |
benzoylekgonin |
cze |
dc.subject |
extrakce pevnou fází |
cze |
dc.subject |
plynová chromatografie s hmotnostní detekcí |
cze |
dc.title |
Stanovení kokainu v biologické matrici |
cze |
dc.title.alternative |
Determination of cocaine in biological matrices |
eng |
dc.type |
diplomová práce |
cze |
dc.date.accepted |
2009 |
|
dc.description.abstract-translated |
The aim of the thesis was to find useful method for the determination of cocaine and its metabolite benzoylecgonine in human serum and urine. Theoretical part of the thesis brings basic information on drugs, especially on cocaine. Further, it describes most frequently used methods for the determination of drugs in biological materials. Experimental part deals with the determination of cocaine and benzoylecgonine in human serum and urine. For the pretreatment of samples, we used liquid-liquid and solid phase extractions before GC-MS separation. For liquid-liquid extraction, we used the following three extraction reagents - methylene chloride:2-propanol, chloroform:2-propanol and chloroform:ethanol. In the solid phase extraction, we tested columns Bond Elut LRC-Certify and LiChrolut TSC with two kinds of eluate reagents - methylene chloride:2-propanol:amonnium hydroxide and methanol:amonnium hydroxide. In the separation of cocaine and benzoylecgonine, we used GC-MS (quadrupole, electron ionisation). Cocaine-D3 was used as internal standard. For the gas chromatography, it was necessary to proceed the derivatisation. We tested BSTFA with 1 % TMCS and MSTFA with ethanethiol and ammonium iodide as the derivatisation reagent. We compared all results of methods of pretreatment and derivatisation samples. As the optimal method for the determination of cocaine and benzoylecgonine, we selected extraction with columns Bond Elut LRC-Certify with elution methanol:amonnium hydroxide and derivatisation with BSTFA with 1 % TMCS in temperature 70 °C for 30 minutes. Further, we created calibration for the optimal method. We used this method for analyses of real and control samples. |
eng |
dc.description.department |
Katedra biologických a biochemických věd |
cze |
dc.thesis.degree-discipline |
Analýza biologických materiálů |
cze |
dc.thesis.degree-name |
Mgr. |
cze |
dc.thesis.degree-grantor |
Univerzita Pardubice. Fakulta chemicko-technologická |
cze |
dc.identifier.signature |
D20340 |
|
dc.thesis.degree-program |
Speciální chemicko-biologické obory |
cze |
dc.description.grade |
Dokončená práce s úspěšnou obhajobou |
cze |