Vliv separačních podmínek na funkční vlastnosti granulocytů izolovaných z periferní lidské krve

Zobrazit minimální záznam

dc.contributor.advisor Šinkorová, Zuzana cze
dc.contributor.author Hromádková, Lenka
dc.date.accessioned 2012-07-15T22:43:42Z
dc.date.available 2012-07-15T22:43:42Z
dc.date.issued 2012
dc.identifier Univerzitní knihovna (sklad) cze
dc.identifier.uri http://hdl.handle.net/10195/46332
dc.description.abstract Diplomová práce je členěna na dvě hlavní osnovní části: teoretickou část a experimentální část. V teoretické části jsou shrnuta fakta o nejvíce zastoupené populaci fagocytujících granulocytů - neutrofilech. Je blíže popsán proces fagocytózy a základní mechanismy v obraně proti cizorodým agens. Následuje popis průtokového cytometru a jeho hlavních součástí. Jsou ukázány možnosti využití průtokového cytometru v analýze funkčních vlastností neutrofilů jako významného analytického nástroje v diagnóze imunodeficiencí souvisejících s buněčnou přirozenou imunitou. Cílem předkládaného experimentu byla optimalizace metody třídění granulocytů periferní krve na průtokovém třídiči buněk s ohledem na následně prováděnou analýzu fagocytární aktivity měřenou jako míru oxidativního vzplanutí po stimulaci buněčnou suspenzí inaktivovaných bakterií E.coli. Byla také analyzována míra apoptózy. V prvé řadě byla nutná úprava vzorku nesrážlivé periferní krve před vlastním tříděním granulocytů. Na základě výsledků fagotestu byla úprava prováděna sedimentací periferní krve v inzulinových stříkačkách o objemu 1 ml po dobu 30 minut při laboratorní teplotě. Měnícím parametrem průtokového třídiče buněk byl průměr otvoru nozzlu. Analýzy byly prováděny při třech různých průměrech: 70 ?m, 85 ?m a 100 ?m. Bylo zjištěno, že již vlastní separace granulocytů třídičem buněk měla vliv na jejich schopnost fagocytózy a tvorbu ROS. Byly zjištěny významné rozdíly středních hodnot fluorescence (MFI) granulocytární populace v závislosti na použitém nozzlu. cze
dc.format 102 s. cze
dc.format.extent 2421752 bytes cze
dc.format.mimetype application/pdf cze
dc.language.iso cze
dc.publisher Univerzita Pardubice cze
dc.rights Pouze v rámci univerzity cze
dc.subject granulocyt cze
dc.subject průtoková cytometrie cze
dc.subject apoptóza cze
dc.subject oxidativní vzplanutí cze
dc.subject granulocyte eng
dc.subject flow cytometry eng
dc.subject apoptosis eng
dc.subject oxidative burst eng
dc.title Vliv separačních podmínek na funkční vlastnosti granulocytů izolovaných z periferní lidské krve cze
dc.title.alternative Effect of Separation Methods to the Functional Properties of Peripheral Blood Granulocytes eng
dc.type diplomová práce cze
dc.contributor.referee Tichý, Aleš cze
dc.date.accepted 2012 cze
dc.description.abstract-translated The thesis is divided into two main warp parts: a theoretical part and an experimental part. The theoretical section summarizes the facts about the most abundant population of phagocytic granulocytes - neutrophils. It is described in more detail the process of phagocytosis, and the fundamental mechanisms of defense against foreign agents. The following part is a description of the flow cytometer and its main components. There is also indicated the possibility of using flow cytometry in the analysis of functional properties of neutrophils as an important analytical tool in the diagnosis of immunodeficiency associated with cellular innate immunity. The aim of the experiment was to optimize methods for sorting of granulocytes in peripheral blood by cell sorter with regard to the subsequent analysis of phagocytic activity as measured by degree of oxidative burst after stimulation with cell suspension of inactivated E.coli . It was also analyzed the rate of apoptosis. First, it was necessary to optimalize sample preparation of human peripheral blood. Based on the results of phagotest, the peripheral blood had been settling in the insulin syringes of 1 ml for 30 minutes at room temperature. Nozzle diameter in the flow cytometer was the parameter that was changed. Analyses were performed at three different diameters : 70 micron , 85 micron and 100 micron. It was found that already own cell sorter separation of granulocytes had an impact on their ability to phagocytosis and ROS production . There were significant differences of mean values of fluorescence (MFI) of granulocyte population depending on the nozzle. eng
dc.description.department Katedra biologických a biochemických věd cze
dc.thesis.degree-discipline Analýza biologických materiálů cze
dc.thesis.degree-name Mgr. cze
dc.thesis.degree-grantor Univerzita Pardubice. Fakulta chemicko-technologická cze
dc.identifier.signature D26604 cze
dc.thesis.degree-program Speciální chemicko-biologické obory cze
dc.description.defence 1. Prezentace výsledků diplomové práce 2. Diskuze k posudkům vedoucího a oponenta diplomové práce 3. Diplomantka zodpověděla všechny dotazy a připomínky k DP cze
dc.identifier.stag 18396 cze
dc.description.grade Dokončená práce s úspěšnou obhajobou cze


Tento záznam se objevuje v následujících kolekcích

Zobrazit minimální záznam

Vyhledávání


Rozšířené hledání

Procházet

Můj účet